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發布時間：2021-07-16 10:41
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選擇素elisa試劑盒的實驗原理
選擇素elisa試劑盒是一類異親型結合、Ca2 依賴的細胞粘著分子，能與特異糖基識別并結合。主要參與白細胞與血管內皮細胞之間的識別與粘著。
實驗原理：
將目標包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入品或標本，其中的目標連接于固相載體上的結合，然后加入微生物化的目標，將未結合的生物素洗凈后，加入HRP標記和親和素，再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶1標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。
精密度：精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV（%）=SD/mean×100
批內差：取同批次選擇素elisa試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測，每份樣本連續測定20次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差： CV<10% Inter-批間差： CV<13%
經測定，試劑盒在X期內按推薦溫度保存，其活性率小于5%。為減小外部因素對試劑盒前后檢測值的影響，實驗室的條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可人為誤差。
選擇素elisa試劑盒識別的配體都是一些寡糖基團，迄今為止發現的配體都是一些具有唾液酸化路易斯寡糖(s-Le，siaglyl-Lewis)或類似結構的分子。一種寡糖基團可以存在多種糖蛋白和糖脂分子上，并分布于多種細胞表面，因此選擇素分子配體在體內分布較為廣泛。
RNA病毒檢測試劑盒產品特點：
1. 凍干粉為逆轉錄酶和Taq酶的預混液，將RNA逆轉錄與qPCR擴增兩個過程合并，一步完成，減少移液次數、避免交叉污染、操作簡單，節約時間。
2. Taq酶具有70°C熱啟動功能，顯著提高試劑盒的特異性和敏感度。
3. 主要組分為凍干粉，4℃保存，儲存運輸方便，性能穩定。
武漢友名生物(U-MeBiotech)技術有限公司成立于2009年5月18日。公司致力于為廣大科研工作者提供品質的生命科學產品和、有效的技術服務。公司對所有崗位員工都經過了嚴格的培訓，對所銷售的產品及其使用都比較熟悉。同時，在公司內部定期開展自我提高學習培訓，由各崗位員工對所銷售的產品進行系統培訓學習，并進行嚴格的考核。這都為公司的化服務提供了有力保障！公司目前主要從事分子生物學，蛋白質研究、細胞學研究，NGS等相關產品的銷售及技術服務，同時也開展生物化學原料的合成，實驗技術服務。
轉移RNA
轉移RNA（tRNA）在蛋白質合成過程中負責轉運氨基酸、解讀mRNA遺傳密碼。tRNA占細胞總RNA的10%~15%，絕大多數位于細胞質中。tRNA由Crick于1955年提出其存在，Zamecnik和 Hoagland于1957年鑒定。
tRNA一級結構具有以下特點：
①是一類單鏈小分子RNA，長73~95nt（共有序列76nt），沉降系數4S。
②是含稀有堿基zui多的RNA，含7-15個稀有堿基（占全部堿基的15%~20%），位于非配對區。
③5′末端堿基往往是鳥piao呤。
④3'端是CCA序列，其中的腺苷酸常稱為A76，其3’—OH是氨基酸結合位點。
植物ＤＮＡ的ＣＴＡＢ提取法：
1 稱取新鮮葉片2-3ｇ,剪碎放入研缽中,在液氮中研磨成粉末。
2 將粉末轉移到的加有7ｍｌ經預熱的1 5×ＣＴＡＢ提取緩沖液15ｍｌ離心管中,迅速混勻后置于65℃水浴中,溫育30ｍｉｎ。
3 取出離心管,冷卻至室溫,加入氯1仿/異戊1醇(24:1),充分混勻,室溫下2300×ｇ離心20ｍｉｎ。
4 將上清轉移至另一新的15ｍｌ離心管中,加入1/10體積10%的ＣＴＡＢ和等體積的氯1仿/異戊1醇。充分混勻,2300×ｇ離心20ｍｉｎ。
5 轉移上清至另一新的15ｍｌ離心管中,加入等體積1%的ＣＴＡＢ沉淀緩沖液,輕輕搖晃至形成ＤＮＡ絮狀沉淀。1000×ｇ離心10ｍｉｎ,使ＤＮＡ沉淀于管底。
6 加入1 5-2ｍｌ的1ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ及5μｌＲＮａｓｅ置于56℃水浴中過夜。待ＤＮＡ完全溶解后,加2-3ｍｌ4℃預冷的95%的冰乙醇使ＤＮＡ沉淀,挑出ＤＮＡ,置于1 5ｍｌ離心管中,用70%乙醇清洗30ｍｉｎ,用離心機甩5ｓ,倒出70%乙醇,再用95%乙醇浸泡5ｍｉｎ,倒出95%乙醇,在超凈工作臺上吹干。
7 將風干的ＤＮＡ直接在4℃保存備用或溶于100μｌＴＥ溶液中于-20℃保存。
