甘肅細(xì)胞培養(yǎng)實驗室常用指南「乾蕓儀器科技」

可用于多個領(lǐng)域，如研究、生物制藥加工；也可為細(xì)胞和組織培養(yǎng)工作提供解決方案：

1）可用于和胚體擴(kuò)增及定向分化

2）可用于細(xì)胞和組織治1療的細(xì)胞制備

3）可用于細(xì)胞，為器1官移植做準(zhǔn)備（例如hip stem, heart valve, graft）

4）可用于制備天然的生物制品（例如糖蛋白、病毒、病毒樣顆粒）觀察細(xì)胞應(yīng)力下實時反映：使用Flexcell獨(dú)有的Flexcell StageFlexer Jr.顯微附屬設(shè)備，可在加力刺激的同時實時觀察細(xì)胞在三維狀態(tài)下牽拉刺激的反應(yīng)多種基質(zhì)蛋白包被的尼龍網(wǎng)錨可以加強(qiáng)細(xì)胞與網(wǎng)錨的結(jié)合

       RCCS?的原理和優(yōu)勢，相比動態(tài)和靜態(tài)組織培養(yǎng)系統(tǒng)，RCCS的主要優(yōu)勢是其能提供培養(yǎng)的環(huán)境，從而允許細(xì)胞聚集、三維生長和分化。這使得RCCS中的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境非常接近于自然界生物體內(nèi)環(huán)境。在大多數(shù)的動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)中細(xì)胞、組織會受損，這主要是這些傳統(tǒng)的動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)都會設(shè)計有用于驅(qū)動培養(yǎng)液運(yùn)動的攪拌裝置，而這種安裝在培養(yǎng)液內(nèi)部的攪拌裝置不可避免地會與細(xì)胞接觸從而破壞或影響細(xì)胞的生長環(huán)境，這與自然的生物體內(nèi)環(huán)境是不符合的。

       細(xì)胞傳代的一般操作方法是在開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全，一般主要有細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液或MEM 培養(yǎng)液或199 等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、慶大溶液（1 萬單位）、7.5％NaHC03 溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS 洗液等。工具有小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1）、細(xì)胞吹打管（20 ml）(以上用具需經(jīng)121℃至少15 分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱等；

       操作步驟一般是鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可X疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液100ml 內(nèi)，加入滅活小牛血X清10m1，慶大溶液0.3m1，7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS 洗液沖洗細(xì)胞表面1-2 次，每次10m1，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2～4 天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。

       以上方法僅供參考！