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              血液DNA提取服務為先 友名生物技術

              發布時間:2021-09-07 03:37  

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              ELISA定性測定

              定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或antibody作出'有'或'無'的簡單回答,分別用'陽性'、'陰性'表示。'陽性'表示該標本在該測定系統中有反應。'陰性'則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結果,即用滴度來表示反應的強度,其實質仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應的zui高稀釋度即為滴度。根據滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。

              在間接法和夾心法ELISA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。



              總RNA的抽提方法:

              目前常用的方法是用異硫qing酸胍苯1酚抽提法。


              提取步驟:

              先用液氮研磨材料,勻漿,加入Trizol試劑,進一步破碎細胞并溶解細胞成分。然后加入氯1仿抽提,離心,分離水相和有機相,收集含有RNA的水相,通過異丙1醇沉淀,獲得比較純的總RNA,用于下一步mRNA的純化。也可將含有RNA樣品的細胞破碎液通過硅膠膜純化柱純化。

              RNA濃度和純度判斷:

              OD260為1時相當于濃度為50 ug/mL;

              OD260/0D280值在1.8~ 2.0之間,表示純度較好;

              0D260/OD280值低于1.8,樣品有蛋白質或酚污染;

              0D260/0D280值大于2.0,提取的RNA可能有降解;

              電泳后如果rRNA大小完整,而且28S rRNA和18SrRNA亮度接近2:1、mRNA分布均勻,則認為RNA。






              酵母基因組DNA提取好方法

              DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫CN酸胍法、堿裂解法。生物方式:酶法。根據核酸分離純化方式的不同有;硅質材料、陰離子交換樹脂等。

              提取基因組DNA和細胞核DNA是不同的方法

              提取細胞核要先把細胞破碎分離出細胞核,要在甘油或其他保護劑中進行

              SDS十二烷基磺酸鈉:可破壞細胞膜、核膜,并使組織蛋白與DNA分離

              CATB是一種抽提液,破壞細胞膜的~

              DNA不溶于異丙1醇,異丙1醇可以析出DNA,產生白色絮狀沉淀,用槍頭挑出就可以了



              病毒核酸提取就像'針尖上跳舞'

              檢驗的首要一步是病毒核酸提取,這也是zui危險的一步,需要在專門的生物安全二級實驗室里進行。檢測人員要在清潔區穿戴兩套防護服、兩副乳膠手套,戴護目鏡,穿靴套,前后穿過6道門,才能到達核心實驗區,病毒核酸提取就像是“針尖上的舞蹈”。“每次脫下防護服,衣服都濕透了。在2—4個小時的病毒核酸提取實驗過程中,一般都會安排兩人一組進行檢驗,既是規定要求,也是防止工作人員在密閉的負壓實驗空間里出現意外。



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