您好,歡迎來到易龍商務(wù)網(wǎng)!
發(fā)布時間:2021-09-01 03:09  
【廣告】





蛋白質(zhì)結(jié)晶技術(shù)發(fā)展的艱難歷程
科學(xué)家們研究蛋白質(zhì)結(jié)晶技術(shù)花費了很長時間。1988年諾貝爾化學(xué)獎被授予三位德國科學(xué)家,原因是三個人通力合作,在世界上解析了一種膜蛋白——菌光合反應(yīng)中心的高分辨率三維結(jié)構(gòu),它拉開了膜蛋白結(jié)構(gòu)生物學(xué)的序幕,在生物學(xué)界影響非常大。之后,科學(xué)家們在基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域不斷取得新進展,可以作為潛在靶向的蛋白質(zhì)的數(shù)量呈指數(shù)級增加,然而這些方法獲得有用晶體的成功率不足20%。
2011年,英國帝國理工學(xué)院和薩里大學(xué)的科學(xué)家們使用一種“分子印跡聚合物(MIPs)”的材料,研發(fā)出了一種更有效的制造蛋白質(zhì)晶體的方法。但是這種方法在結(jié)晶條件成分復(fù)雜,包含高鹽,,寬泛的酸堿區(qū)間等條件下,容易造成MIPs對蛋白質(zhì)的印記作用失效。科研不斷深入,技術(shù)不斷迭代,目前,應(yīng)用為廣泛的晶體制備方法當(dāng)屬規(guī)模篩選,比如高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選,即從成百上千個溶液條件中篩選出適合結(jié)晶的條件。據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)顯示,目前的高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的成功率僅為15.6%,嚴(yán)重制約了蛋白質(zhì)結(jié)晶技術(shù)在結(jié)構(gòu)生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用和發(fā)展。缺乏、廣譜的蛋白晶體制備技術(shù)是目前結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究中的技術(shù)瓶頸。
近期,由深圳先進技術(shù)研究院喻學(xué)鋒研究員課題組研發(fā)的一種蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選添加劑——人工晶種混懸液打破了技術(shù)桎梏。新法的應(yīng)用,能夠讓蛋白質(zhì)晶體的結(jié)晶更簡便,更科學(xué),更完整。
蛋白結(jié)晶板概念
不能模擬形狀分布,因為模型中的晶體尺寸被簡單的定義為該晶體的體積當(dāng)量直徑.本提出了一個適用于蛋白質(zhì)結(jié)晶過程的基于晶體形狀結(jié)構(gòu)的群體粒數(shù)衡算模型.在該模型中,蛋白質(zhì)晶體的形狀被定量描述為每個晶面到晶體幾何中心的距離,由此提出了基于蛋白質(zhì)晶形的多維粒度分布,即形狀分布的概念.以溶菌酶結(jié)晶過程為例,對溶菌酶晶體結(jié)晶的熱力學(xué)和動力學(xué)行為進行了分析和研究,應(yīng)用非線性回歸的方法,確定了四方系溶菌酶的結(jié)晶動力學(xué)方程參數(shù).結(jié)合本提出的基于晶體形狀結(jié)構(gòu)的群體粒數(shù)衡算模型,質(zhì)量衡算方程。
蛋白質(zhì)晶體板
因而形核劑的使用對于難結(jié)晶蛋白或者起始濃度過低的蛋白質(zhì)結(jié)晶具有重要意義.隨著結(jié)構(gòu)生物學(xué)的發(fā)展,形核劑在蛋白質(zhì)結(jié)晶中的研究仍是結(jié)晶方法學(xué)領(lǐng)域的熱點問題.多孔微球?qū)Φ鞍踪|(zhì)分子的吸附作用有利于無序蛋白質(zhì)分子團簇的形成,進而促進蛋白質(zhì)形核.添加多孔微球不但可以增加結(jié)晶條件篩選數(shù)。
綜述了雜質(zhì)對蛋白質(zhì)晶體生長影響研究領(lǐng)域的進展情況, 對可能的雜質(zhì)來源以及雜質(zhì)對結(jié)晶過程的影響進行了介紹,重點介紹了和結(jié)晶蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)分子的影響, 包括晶體成核、生長形態(tài)、表面形貌、生長動力學(xué)、質(zhì)量等,以及雜質(zhì)在晶體中的重新分配。