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發(fā)布時(shí)間：2021-10-17 07:18
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色譜柱的技術(shù)都有哪些？比如，封尾等，這些技術(shù)在應(yīng)用時(shí)都體現(xiàn)在哪里？
色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)，封尾技術(shù)和裝柱技術(shù)等，填料技術(shù)自不待言，填料的差異對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響，色譜填料的鍵合相密度的不同也會(huì)影響到填料表面硅羥基外露的多少，進(jìn)而影響填料的選擇性。封尾技術(shù)中用到的封尾試劑的差異也會(huì)對色譜柱的性質(zhì)產(chǎn)生很大的影響，如體現(xiàn)在色譜填料的pH耐受范圍，水相耐受范圍，極性強(qiáng)弱等。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。
液相色譜儀在食品安全中的應(yīng)用
液相色譜儀是一種新型綜合分離分析儀器，在液相色譜儀的分離技術(shù)基礎(chǔ)上加入了液相色譜技術(shù)，對分離完成的被測食品基本成分進(jìn)行液相色譜分析，并以高壓輸出的方式實(shí)現(xiàn)對檢測結(jié)果的輸出，Z終形成對被測食品質(zhì)量的綜合檢測結(jié)果。在這一過程中液相色譜儀技術(shù)對被測物質(zhì)的分離主要是靠分離組分的分子與流動(dòng)相分子爭奪吸附表面活性中心的吸附能力差別而實(shí)現(xiàn)的。
液相色譜的操作步驟
1).首先對流動(dòng)相進(jìn)行過濾，根據(jù)需要選擇不同的濾膜，一般為有機(jī)系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。
2).對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3).正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進(jìn)入測試用流動(dòng)相(如流動(dòng)相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機(jī)相沖凈為止)。
4).一般情況下，流動(dòng)相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩(wěn)定，重要的是儀器基線走后，方可進(jìn)樣測試。
5).同時(shí)進(jìn)兩針標(biāo)樣，將其結(jié)果相比較，其結(jié)果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進(jìn)行樣品的測試了。
6).樣品測試結(jié)束后，就要進(jìn)行色譜儀及色譜柱的清洗和維護(hù)。如流動(dòng)相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機(jī)相進(jìn)行保護(hù)，否則，有損色譜柱。
7).關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。
8).填寫登記本，由負(fù)責(zé)人簽字。
制備液相色譜特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)
高壓—壓力可達(dá)150~300Kg/cm2。色譜柱每米降的壓為75 Kg/cm2以上。
高速—流速為0.1~10.0 ml/min。
高效—可達(dá)5000塔板每米。在一根柱中同時(shí)分離成份可達(dá)100種。
高靈敏度—紫外檢測器靈敏度可達(dá)0.01ng。同時(shí)消耗樣品少。
HPLC與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點(diǎn)：
速度快—通常分析一個(gè)樣品在15~30 min，有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。
分辨率高—可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到較好分離效果。
靈敏度高—紫外檢測器可達(dá)0.01ng，熒光和電化學(xué)檢測器可達(dá)0.1pg。
柱子可反復(fù)使用—用一根色譜柱可分離不同的化合物。
樣品量少，容易回收—樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。
