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發布時間:2020-12-28 13:34  
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TLC 薄層層析技術
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薄層色譜法簡稱TLC,是在50年代從經典柱色譜法和紙色譜法基礎上發展起來的一種色譜技術。60年代后,人們對薄層色譜法的標準化、規范化及擴大應用等方面進行了許多工作,使該方法日趨成熟。現已成為現代有機合成、高分子材料分離與解析的重要方法。能夠對正電子發射體和99mTc,111In,131I等標記的放射性藥進行放化純度測定。結合柱分離的薄層色譜技術能夠具有充分的實戰意義。
TLC 方法原理
薄層色譜是一種微量分析的分離過程,它將樣品點在以玻璃板或鋁、塑料等片材為載體的多孔吸附劑薄層的固定相上,利用流動相在特定的展開室中將混合物中的組份推移到不同距離處,在色譜展開整個過程中,樣品的成份受到正反不同的力的作用。
1、 流動相利用毛細管力帶著樣品穿過固定相;
2、樣品與固定相的相互作用是指組份在移行過程中由于偶極 -(誘導) - 偶極相互作用,氫鍵和范德華力的作用而產生不同程度的延緩、吸附、分散、離子交換和絡合等分離機理。
用顯色試劑處理,許多組份可在日光或紫外燈光下檢視。色譜可用肉眼或使用光密度計和照相機記錄或影像系統方法來評價。
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薄層色譜關鍵問題解讀
怎樣提高點樣效率?
點樣是造成TLC定量誤差的主要來源。實驗證明:定量毛細管更適合較小體積的點樣;微量注1射器更適合較大體積的點樣。這主要是因為微量注1射器受小氣泡、溶液回爬現象的影響較大。為避免不同定量毛細管理體制的占樣誤差,建議一塊薄層板上用同一只定量毛細管。經典TLC樣點原點一般為直徑3mm點間距離1-2cm底邊距離1。
在制備樣品時,溶樣溶劑黏度不能過高,以便于點樣;溶劑沸點過低則進樣體積易變,過高則會改變展開劑組成;但是薄層檢查也是藥品質量控制和雜質檢查的一種有效方法,有時甚至比一般方法更有效。對樣品溶解度過高會使樣點發生空心現象。經典TLC樣點原點一般為直徑3mm點間距離1-2cm底邊距離1.5cm;HPLC樣點原點一般為直徑1mm點間距5mm底邊距1cm。
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