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發布時間:2020-12-30 06:39  
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PCR實驗室建設完成,進行實驗過程中易發生污染產生污染主要有以下4個原因:
① 這也是常見的污染原因。重復擴增后,PCR產物的粘貼遠遠超過PCR的檢測限制,所以即使是少量的污染也足以造成假陽性結果。
② 試劑的污染。在試劑的配制過程中,接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導致試劑被污染。
③ 待測樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴導致樣品與外界接觸被污染;其次在核酸提取過程中使用了被污染的移液器或槍頭導致樣品被污染;另外,某些樣品中含有病毒,若彌散到空氣中則有可能形成交叉污染。
④ 氣溶膠污染。如果氣溶膠中含有的病毒等污染物擴散到空氣中,很有可能造成PCR產物的污染。氣溶膠是由空氣和液體表面的摩擦產生的,打開蓋子,搖動反應管,污染采樣器反復吸取樣品,就會形成氣溶膠,造成交叉污染。據計算一個氣溶膠顆粒可含48 000 拷貝,因此,應尤其重視由氣溶膠導致污染的問題。PCR 實驗室只要出現了污染,之前的結果報告就變為無效而且也無法進行其他的實驗操作。需要找出并清除污染源,才能得到準確有效的實驗結果。
以上就是為大家介紹的關于PCR實驗室建設中產生污染的四個原因,因為實驗室要求無菌的特殊環境,所以我們在各個細節都需要注意,嚴謹觸碰安全底線。
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移動式新冠PCR實驗室是新冠病毒下的產物,這種實驗室推動了整個相關部門行業和實驗室行業的發展。如今,大多數醫院和疾控部門的PCR實驗室都需要重建和擴建,因為傳統的聚合酶鏈反應實驗室不能滿足當前新冠病毒的檢測和需求。移動式新冠PCR實驗室建設幫助一些醫院克服了舊建筑和面積不足的問題,這些問題不利于聚合酶鏈反應實驗室的重建和擴建。
如果傳統的PCR實驗室需要改造成新冠PCR實驗室,主要建筑面都是暖通。這些管線布局對建筑有一定的要求。為了保證醫院的正常使用,,嚴格按照《新型冠狀病毒實驗室生物安全指南》(二版)要求進行改建,很多醫院因為面積狹小,氣流紊亂的原因無法滿足裝修改造要求,移動式新冠PCR實驗室正好解決了這個困境,移動式新冠PCR實驗室在工廠嚴格按照以下標準進行設計生產,并且已經完成了單個集裝箱復雜的組裝,只需要安裝現場提供水電,完成簡單的安放拼裝就可以。
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PCR實驗結果中有曲線出現末尾起跳但是沒有完整擴增的現象。
原因分析:
(1)陰參曲線末尾起跳,通常表示存在污染;
(2)復檢樣本,排除非特異性擴增的可能性;
(3)正常樣本也可存在曲線末尾起跳,表示樣本濃度低或者加樣量不準確。
解決方案:排除是否存在污染;排除污染原因后復檢樣本,如果復檢后曲線為陰性直線則說明之前的末尾起跳為非特異性擴增,如果復檢后曲線仍與之前一致則說明末尾起跳表示該樣本中待檢病毒核酸的濃度偏低。