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發(fā)布時間:2020-10-10 04:38  
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PCR實驗室的設(shè)計原則
使用實時熒光PCR儀,擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并;
采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀,則標(biāo)本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。
PCR實驗室各區(qū)功能及主要設(shè)備
擴增產(chǎn)物分析區(qū):擴增產(chǎn)物的測定。本區(qū)主要設(shè)備加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。
PCR實驗室注意事項——擴增產(chǎn)物分析區(qū)
本區(qū)是主要的擴增產(chǎn)物污染來源,因此必須注意避免通過本區(qū)的物品及工作服將擴增產(chǎn)物帶出。在使用PCR-ELISA方法檢測擴增產(chǎn)物時,必須使用洗板,廢液必須收集至1 mol/L HCl中,并且不能在實驗室內(nèi)傾倒,而應(yīng)當(dāng)至遠離PCR實驗室的地方棄掉。
PCR實驗室注意事項——擴增區(qū)
為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)當(dāng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動。必須注意的是,所有經(jīng)過檢測的反應(yīng)管不得在此區(qū)域打開。
PCR實驗室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
PCR實驗室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
PCR實驗室布局
PCR實驗室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域并設(shè)有專用走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。
試劑準(zhǔn)備區(qū):主要進行試劑的制備、分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū),不得經(jīng)過其它區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。