細胞凋亡檢測試劑盒承諾守信「友名生物」

營養(yǎng)條件

1．培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基包含細胞生長所需的各種營養(yǎng)物質，包括碳水化合物、氨基酸、無機鹽、維生素等。針對不同細胞的營養(yǎng)需求，有多種合成培養(yǎng)基可供選擇，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。

2．其他添加成分在各種合成培養(yǎng)基提供基礎營養(yǎng)物質之外，還需根據(jù)不同細胞和不同的培養(yǎng)目的添加其他成分，如血1清、因子等。

血1清提供的是細胞外基質、生長因子和轉鐵蛋白等重要物質，常用的是胎牛血1清。要根據(jù)不同的細胞和不同的研究目的決定添加血1清的比例。10%～20%的血1清能維持細胞較快的生長增殖速度，稱為生長培養(yǎng)液；為維持細胞緩慢生長或不死，添加2%～5%的血1清即可，稱為維持培養(yǎng)液。但血1清中也存在有害于細胞生長和繁殖的物質，如補體、免1疫球蛋白和一些生長抑制因子；成分不明確，影響對結果的分析；不同動物、不同批次的血1清活性差別較大，影響培養(yǎng)效果的穩(wěn)定性。

谷氨酰胺是細胞生長重要的氮源，在細胞生長代謝過程中起重要作用，但由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定容易降解，4℃下放置7天即可分解約50%，故谷氨酰胺需在使用前添加。

細胞傳代

細胞密度達到80%~90%時．去培養(yǎng)基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0．25?TA的胰蛋白酶，放人細胞培養(yǎng)箱3min。加人1ml DMEM完全培養(yǎng)基終止胰酶消化，轉移至15ml離心管。

加入10ml PBS清洗細胞培養(yǎng)盤，轉移至15ml離心管，2000rpmX2min，棄上清液。再加入10ml PBS（經(jīng)高壓滅菌，保存于40C），吹勻，吸取10微升進行計數(shù)，按照1×106/盤接種，在含5%CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

細胞的多能性受到轉錄因子網(wǎng)絡和表觀遺傳學的復雜調控，那么，僅僅依靠導人的幾個轉錄因子是如何完成這一復雜的任務，從而誘導出具有多能性的細胞呢?深入研究體細胞重編程的分子機制，調控機制以及體外定向誘導分化機制也是未來研究的重要任務之一。

1，逆轉錄病毒和慢病毒載體導致tumour發(fā)生的潛在風險需要加以有效防范。

2，需要深入研究比較iPS細胞和hES細胞在細胞生物學的特性、 定向分化機制等方面是否具有顯著的差異。

3，需建立一種新的方法以避免基因轉染或基因轉導帶來的潛在風險, 如通過某些化學物品或因子喚醒體細胞中固有的上述轉錄因子的方式以替換外源性基因轉染的方式, 或者用某些因子的短暫性表達代替永1久性導入。