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發(fā)布時間:2020-08-25 07:27  
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在眾多的生物實驗室,分子生物學(xué)檢測方法如PCR因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢已經(jīng)被廣泛應(yīng)用,不過正是由于它靈敏度極高,微量的污染源都有可能導(dǎo)致檢測結(jié)果的假陽性,所以對環(huán)境污染的控制也極為嚴(yán)格。面對眾多的污染源,比如樣本交叉污染、試劑儀器交叉污染、質(zhì)粒污染、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染、還有極容易忽視的氣溶膠污染,氣溶膠是由固體或液體小質(zhì)點分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系,在空氣與液體面摩擦?xí)r,比如在操作時比較劇烈地?fù)u動反應(yīng)管,開蓋時、吸樣時及污染進(jìn)樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染。據(jù)計算一個氣溶膠顆粒可含48000拷貝,因而由其造成的污染是一個非常重要而被忽視的污染源。
檢測過程對可能出現(xiàn)的假陽性和假陰性進(jìn)行質(zhì)量控制,除了檢測商品試劑盒所提供陽性和陰性對照外,每次臨床樣本檢測時,至少應(yīng)當(dāng)有1份弱陽性和3份陰性質(zhì)控樣本(多份陰性質(zhì)控樣本設(shè)置對實驗室“污染”所致假陽性的監(jiān)控更為有效),隨機(jī)放在所檢測標(biāo)本的中間。弱陽性質(zhì)控樣本可為檢測陽性的滅活稀釋后保存的臨床樣本、滅活病毒或假病毒顆粒等,如所采用的商品化試劑盒有“內(nèi)標(biāo)”控制假陰性,或弱陽性質(zhì)控樣本來源困難,可暫不設(shè)弱陽性質(zhì)控。陰性質(zhì)控樣本采用標(biāo)本采集管內(nèi)溶液即可。質(zhì)控樣本應(yīng)與臨床標(biāo)本同等對待,參與樣本核酸提取和擴(kuò)增檢測全過程。
數(shù)據(jù)分析軟件:這是NGS實驗室特有的環(huán)節(jié),實驗室需要用商品試劑配套的軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,并確認(rèn)使用軟件的版本和數(shù)據(jù)庫的現(xiàn)行有效版本;數(shù)據(jù)需要專業(yè)的生信人員進(jìn)行分析,需要在數(shù)據(jù)預(yù)處理、數(shù)據(jù)比對、數(shù)據(jù)質(zhì)控、分析判斷等每個流程進(jìn)行質(zhì)控,確保數(shù)據(jù)分析的準(zhǔn)確性。檢查人員強(qiáng)調(diào),實驗室安全關(guān)系到全監(jiān)測站每一位職工的安全,特別是有毒有害試劑的存放管理要嚴(yán)格、規(guī)范,有毒有害試劑的泄漏、流出和使用不當(dāng)均會帶來不可估計的損失,要做到“全覆蓋、零容忍”,堅決杜絕有毒有害試劑事故的發(fā)生,確保職工的人身財產(chǎn)安全,維護(hù)單位工作環(huán)境和諧穩(wěn)定。