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發布時間：2021-09-25 19:00
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ELISA試劑盒——會出現的問題及解決辦法
吸光值均偏高(或線性不夠陡)。
a.原因：室溫太高(>25℃)。
解決辦法： 若無法降低室內溫度，請適當縮短步驟4的溫育時間。
b.原因：底物溶液受到污染。
解決辦法： 若發現底物溶液已呈現淡藍色，請不要再使用。
c.原因：反應時間超過太久。
解決辦法：請控制反應時間。
d.原因：酶標記物污染了盒內其它試劑。
解決辦法：使用過的吸頭應立即丟棄，可避免試劑間相互污染，凡是試劑(特別是酶標記物與底物溶液)接觸過的容器應立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡，再以清水沖洗干凈，可確保無殘留)
Elisa試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測肌肉組織、牛奶等樣品中的米松（Dexamethasone，DEX），試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、酶標記物、、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的米松藥品和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗米松藥類，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含米松藥品含量成負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中米松藥品的殘留量。
Elisa試劑盒的注意事項
Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅清中補體系統，在較少數情況下（培養ES細胞，平滑肌細胞時）建議滅活，在培養其余細胞時不建議滅清。滅活非常容易產生沉淀，如必須滅活請按56℃，30 min，輕微搖晃原則操作，滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產生沉淀。
Elisa試劑盒培養基：無培養基在結果重復性、細胞體外分化方面有優勢，但是，仍然是培養液中基本的添加物，尤其是在原代培養或細胞生長狀態不良時，常常會先使用有的培養液進行培養，待細胞生長旺盛后再換成培養液。
Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案
不正常的標準曲線
1 錯誤的方法重懸標準品 加入正確量的溶液重懸標準品，重懸充分
2 標準品稀釋錯誤 按照說明書要求稀釋標準品
3 標準品污染 使用一次性的滅菌吸頭， 標準品貯存于2-8 ℃
4 錯誤的倍比稀釋步驟 按照說明書倍比稀釋標準品
5 波長選擇錯誤 TMB為底物和以OPD為底物的試劑盒均有使用，而 前者比色波長為450nm，后者為492nm。雙波長比色分析優于單波長。
6 標準品混用 不同批號試劑勿混用
7 試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高，標準品失活 盡量縮短運輸時間，夏季應放冰塊降溫
8 ELISA未終止而直接檢測450nm和620nm TMB顯色需終止后檢測，否則會出現620nm比450nm讀數高的現象。（數值仍有梯度規律）
