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發布時間:2020-12-16 18:55  
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低溫生物菌種的注意事項
無論采用何種保藏方法,首先應該挑選典型菌種的優良純種來進行保藏,保藏它們的休眠體,如分生孢子、芽孢等。其次,應根據微生物生理、生化特點,人為地創造環境條件,使微生物長期處于代謝不活潑、生長繁殖受抑制的休眠狀態。這些人工造成的環境主要是干燥、低溫和缺氧,另外,避光、缺乏營養、添加保護劑或酸度中和劑也能有效提高保藏效果。
低溫生物菌種烘干方法
微生物菌種低溫烘干裝置是用于對微生物菌種進行烘干使用的裝置,通過產生較低的熱量,對微生物菌種進行長時間的烘干,在不破壞微生物菌種的同時去除微生物菌種中的水分,廣泛的使用在微生物菌種的培育實驗場合,而微生物菌種低溫烘干裝置已經無法滿足人們的使用,需要更方便使用的微生物菌種低溫烘干裝置;在微生物菌種低溫烘干裝置使用時,無法對放置的微生物菌種進行旋轉,導致了微生物菌種受熱面積不夠均衡,從而烘干的不夠徹底,同時,不能夠對放置的位置和高度進行調整,從而不方便不同體積的微生物菌種器皿擺放進行烘干。
低溫生物菌種退化的原因是什么?
退化(degeneration):菌種在培養或保藏過程中,由于自發突變的存在,出現某 些原有優良生產性狀的劣化、遺傳標記的丟失等現象,稱為菌種的退化。菌種退化不是突然發生的,而是從量變到質變的逐步演變過程。開始時,在群體細胞中僅有個別細胞發生自發突變(一般均為負變),不會使群體菌株性能發生改變。經過連續傳代,群體中的負變個體達到一定數量,發展成為優勢群體,從而使整個群體表現為嚴重的退。經分析發現,導致這一現象的原因有以下幾方面。
1. 基因突變:1.有關基因發生負突變導致菌種退化 菌種退化的主要原因是有關基因的負突變。如果控制產量的基因發生負突變,則表現為產量下降;如果控制孢子生成的基因發生負突變,則產生孢子的能力下降。菌種在移種傳代過程中會發生自發突變。雖然自發突變的幾率很低(一般為10-6~10-9),尤其是對于某一特定基因來說,突變頻率更低。但是由于微生物具有極高的代謝繁殖能力,隨著傳代次數增加,退細胞的數目就會不斷增加,在數量上逐漸占優勢,成為一株退化了的菌株。
2.表型延遲造成菌種退化 表型延遲現象也會造成菌種退化。如,在誘變育種過程中,經常會發現某菌株初篩時產量較高,進行復篩時產量卻下降了。
分離篩選低溫生物菌種的基本程序
流程
4.1 優良糖化酶菌株的分離與篩選
融化培養基→倒平板→打散孢子團粒→梯度稀釋→涂布平板→培養觀察→滴加碘液→挑菌落→接種→培養→糖化酶活力測定→菌種保存
4.2 酸乳制品中的乳酸菌的分離
制培養基→倒平板→梯度稀釋→涂布平板→培養觀察→挑菌落→接牛乳管→培養觀察→傳代培養→挑選凝乳管→乳酸測定→菌種保存
5 步驟
優良糖化酶菌株的分離與篩選
(1)融化淀粉察氏培養基,稍冷后倒平板與斜面數個。
(2)取種曲少許,加入10mL帶玻璃球的無菌生理鹽水的三角瓶中,用力振蕩打散孢子團粒,使之形成均勻的孢子懸浮粒。然后將其用無菌紗布過濾于無菌試管中。
(3)將上述濾液以10倍稀釋法知釋至10-7,取后3個稀釋度的稀釋液各0.2mL,于淀粉察氏培養基平板上用無菌涂布器分別依次涂布2至3個皿,30℃培養1~2d。
(5)性能測定:測定各菌落的糖化酶活力。