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發布時間：2020-12-26 17:05
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微生物菌種需要呼吸嗎?
在任何情況下，只要是活的微生物細胞，就需要呼吸。只不過在不同的環境中和條件下，微生物的呼吸速率也不同。
對于好氧型異養微生物來說，如果溫度、水分、營養物質供給等條件合適，微生物的生長繁殖速度非常快，呼吸速率也非常高。如果外界因素變化，或某個條件不適合微生物生長，其生長繁殖速度就會降低，呼吸速率相應下降。
如果是微生物保藏菌種，通常會限制某些方面的條件來降低微生物細胞新陳代謝速率，如低溫、干燥、缺氧、缺乏營養等，其外在的表現就是呼吸速率降低。
但不管怎樣的保藏條件，只要是細胞，就總是會有新陳代謝活動的，也總是會有呼吸的，只是呼吸速率的高低問題。
所以，任何微生物菌種都需要呼吸。
如何對微生物菌種進行活化
1 定期移植法的菌種復蘇較簡單，直接轉接即可；
2 液體石蠟法保存的菌種在復蘇時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上，生長繁殖后，再重新轉接一次；
3 沙土管法保存菌種在復蘇時，在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養基上，長出菌落后再轉接一次。或取沙土粒于適宜的液體培養基中，增殖培養后再轉接斜面；
4 真空冷凍干燥法保存菌種在復蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱， 用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養基上，進行適溫培養；
5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇時，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止，約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養
6 液氮超低溫凍結法保存菌種復蘇與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇相似，從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養。
低溫生物菌種為什么能適應低溫環境？
微生物對溫度的要求不同與它們的膜結構物理化學性質有密切關系 根據細胞膜的液體鑲嵌模型，細胞在正常生理條件下，膜中的脂質成分應保持液晶狀態，只有當細胞膜處于液晶狀態，才能維持細胞的正常生理功能，使細胞處于生長狀態微生物的生長溫度與細胞膜的液晶溫度范圍相一致。
1、蛋白質結構
通過對嗜冷酶的蛋白質模型和x一射線衍射分析表明，嗜冷酶分子間的作用力減弱，與溶劑的作用加強，酶結構的柔韌性增加，使酶在低溫下容易被底物誘導產生催化作用。
2、蛋白質合成
嗜冷菌具有在0℃合成蛋白質的能力。這是由于其核糖體、酶類以及細胞中的可溶性因子等對低溫的適應，蛋白質翻譯的錯誤率相對低。許多中溫菌不能在O0C合成蛋白質，一方面是由于其核糖體對低溫的不適應，翻譯過程中不能形成有效的起始復合物，另一方面是由于低溫下細胞膜的破壞導致氨基酸等內容物的泄露。
3、合成冷蛋白
低溫微生物適應低溫的另一機制是合成冷休蛋白 將大腸菌從370C突然轉移到100C條件時細胞中會誘導合成一組冷休蛋白，它們對低溫的生理適應過程中發揮著重要作用，檢測嗜冷酵母的冷休反應，發現冷刺激后冷休蛋白在很短時間內大量產生。 耐冷菌由于生活在溫度波動的環境中，它們必須忍受溫度的快速降低，這與它們產生的冷休蛋白是密切相關的。
低溫生物菌種的寄主分離法
即從生長有某種真菌的寄主體上(如茯苓、木耳木段)取下木片，進行分離的方法。如木耳制種時，可選朵大、出耳多、質厚的耳棒(即長有木耳的木段)。采集后，削去耳根下的樹皮，將其橫斷面鋸成1 厘米厚的木片，在無菌條件下，切去無耳菌絲部分，留下有耳菌絲部分，浸入0 . 1 %水中1 分鐘，取出再用無菌水沖去木片上的液。然后，用解剖刀將木片切成0 . 5 厘米的小塊，放入斜面培養基內，置24 ~26 ℃下培養，及時淘汰雜菌，選取純菌絲進行移植培養，即得菌種。
