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發布時間:2021-09-07 13:29  
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制備色譜能當分析色譜用嗎?
制備色譜與分析色譜差別較大在于精度。制備色譜為了獲得分離物質的純度和量,適當的放棄了對于精度的苛求。制備色譜當做分析色譜用,應該針對具體的樣品情況而定。樣品較易分離時,制備色譜還是可以當分析色譜使用。分析色譜:在乎分析結果,對化驗結果的純度,比例等要求準確,而對收率,濃度等產品參數不在乎,一次進料,而且每次進料少;制備色譜:比較在乎高效能得到純化物質。
超級制備色譜系統
流動相的選擇
除了和分析色譜同樣的考慮外,在選用流動相時,要考慮色譜分離后面加有旋轉蒸發等二次分離操作。一般來說,不宜采用高毒性溶劑,對多元溶劑要盡可能的少用。
如果產品中含有大量溶劑,溶劑的純度也要考慮在其中。
加樣的方法
可以采用以下方法之一進樣。-用進樣-用旋轉閥進樣-通過六通閥進樣-通過主泵進樣-通過輔泵進樣-固體上樣
泵的選用
生產制備色譜泵的廠商很多。根據有無脈沖、能承受的大壓力、控制的精度、售后服務等來選擇泵。
檢測器的選用
一般的分析池的大允許流速僅為5 mL/min 或者10mL/min。而專門的制備池的大允許流速可為150mL/min。有時,采用旁路分離管,將少量流體導入分析池進行檢測,是一個不錯的辦法,但其濃度的誤差會相對較大。
我想用hplc分離一個簡單的多肽,我應該選用什么樣的流動相,還有他的梯度,還有選用什么樣的柱子
答: RP-HPLC,C18柱可以制備很少量的肽。如果用RP-HPLC,首先應該用同類型的分析柱子分析一下多肽含多少雜質,設置緩緩的梯度的分離樣品,在根據分析柱子跑出的峰形,逐漸放大純化的方法。