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發(fā)布時(shí)間：2021-05-02 14:00
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；通過(guò)凍融法將重組質(zhì)粒pBRSAg轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)LBA4404中，利用農(nóng)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化葉盤(pán)，經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得植株。可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
目的構(gòu)建通用型植物GFP標(biāo)簽蛋白表達(dá)載體,研究蛋白質(zhì)的細(xì)胞內(nèi)定位對(duì)蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)等研究的意義。方法構(gòu)建2種GFP標(biāo)簽蛋白質(zhì)表達(dá)載體,分別在GFP的N和C端預(yù)留位點(diǎn),以目的基因。利用該基因載體,分別內(nèi)切酶Fok I的切割結(jié)構(gòu)域與MS2噬菌體外殼蛋白MCP的串聯(lián)蛋白（Fok I：MCP：Fok I,FMF）至GFP的N和C端,得到FMF與GFP的融合蛋白GFP：FMF和FMF：GFP,其中FMF的N端帶有細(xì)胞核定位信號(hào)。利用農(nóng)介導(dǎo)植物瞬時(shí)表達(dá)侵染本氏和洋蔥表皮細(xì)胞,觀察GFP熒光表達(dá)情況。結(jié)果成功構(gòu)建了2種融合了目的基因和GFP的表達(dá)載體p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦結(jié)果顯示侵染了只含GFP載體的農(nóng)的細(xì)胞,可在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中檢測(cè)到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號(hào)FMF：GFP和GFP：FMF 2種融合蛋白載體的農(nóng)的細(xì)胞,只在細(xì)胞核中觀察到綠色熒光。利用DW-ACP-PCR(DNAWalking-AnnealingControlPrimer-PCR)技術(shù)對(duì)T-DNA右邊界側(cè)翼序列進(jìn)行擴(kuò)增,7個(gè)突變體都獲得了特異條帶。結(jié)論該載體系統(tǒng)可運(yùn)用于研究蛋白質(zhì)在植物細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位,具有簡(jiǎn)單、和通用性的特點(diǎn)。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；這樣，若在熒光顯微鏡下看到細(xì)胞內(nèi)某一部位存在GFP信號(hào)，說(shuō)明和GFP融合的蛋白也存在于該部位，這樣就達(dá)到了確定某物質(zhì)亞細(xì)胞定位的目的。可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；近年來(lái),基因工程技術(shù)被廣泛應(yīng)用于提高植物的耐鹽性,將抗逆基因?qū)雰?yōu)良大豆品種,培育抗逆高產(chǎn)新品系,為解決這一問(wèn)題提供了新途徑。可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
