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發布時間:2021-07-06 06:19  
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抑菌效力
適用性檢查 取大腸埃希菌、金黃色球菌、銅綠假單胞菌各50~100cfu,分別注入無菌平皿中,立即傾注胰酪胨大豆瓊脂培養基,每株試驗菌平行制備2個平皿,混勻,凝固,置30~35℃培養48小時,計數;包括生產型食品微生物(醋酸,酵母菌等)和是食物變質(霉菌,細菌等)和食源病原微生物(大腸菌,肉毒菌等)。取白色nian珠菌、黑曲霉各50~100cfu,分別注入無菌平皿中,立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養基,每株試驗菌平行制備2個平皿,混勻,凝固,置20~25℃培養72小時,計數;同時,用對應的對照培養基替代被檢培養基進行上述試驗。
微生物計數
3.濾膜法
濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器。然后將濾膜干燥、染色,并經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上(或一定面積上)的細菌數。
此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數。例如測定飲用水中大腸gan菌的數目:將已知體積的水過濾后,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養。微生物保存基本原理是在挑選優良純培養物并使其處于休眠狀態基礎上,人為地創造一個有利于休眠的環境,使其長期保存后仍能保持zhong原有的優良特性。在該培養基上大腸gan菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸gan菌的數目。
此法也是統計樣品中活菌的數目。
4.比濁法
原理是在一定范圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大。因此可借助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量。實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內,否則不準確。
5.顯微鏡直接計數法
在課本生物選修1生物技術實踐P22中“除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法。”這里說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋涂布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數。液體培養:在實驗中,通過液體培養可以使微生物迅速繁殖,獲得大量的培養物,在一定條件下,還是微生物選擇增菌的有效方法。再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況。
另外,微生物計數法發展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目。
微生物限度檢查
2.接種和稀釋
按下列要求進行供試液的接種和稀釋,制備微生物回收試驗用供試液。所加菌液的體積應不超過供試液體積的1%。為確認供試品中的微生物能被充分檢出,首先應選擇zui低稀釋級的供試液進行計數方法適用性試驗。
(1)試驗組 取上述制備好的供試液,加入試驗菌液,混勻,使每1ml供試液或每張濾膜所濾過的供試液中含菌量不大于100cfu。
(2)供試品對照組 取制備好的供試液,以稀釋液代替菌液同試驗組操作。
(3)菌液對照組取 不含中和劑及滅活劑的相應稀釋液替代供試液,按試驗組操作加入試驗菌液并進行微生物回收試驗。
若因供試品抗jun活性或溶解性較差的原因導致無法選擇zui低稀釋級的供試液進行方法適用性試驗時,應采用適宜的方法對供試液進行進一步的處理。除另有規定外,本檢查法中細菌及控制菌培養溫度為30℃~35℃。如果供試品對微生物生長的抑制作用無法以其他方法消除,供試液可經過中和、稀釋或薄膜過濾處理后再加入試驗菌懸液進行方法適用性試驗。
各品種項下規定的微生物限度標準解釋如下:
10^1cfu:可接受的zui大菌數為20;
10^2cfu:可接受的zui大菌數為200;
10^3cfu:可接受的zui大菌數為2000,依此類推。
若供試品的需氧菌總數、霉菌和酵母菌總數的檢查結果均符合該品種項下的規定,判供試品符合規定;若其中任何一項不符合該品種項下的規定,判供試品不符合規定。
稀釋液、沖洗液及培養基
見非無菌產品微生物限度檢查:控制菌檢查法(通則1106)。