辛基SPE柱廠家在線咨詢【碩譜生物】

廣州碩譜生物科技有限公司辛基SPE柱廠家

SPE小柱保留雜質固相萃取操作一般有三步：

1）、活化--除去柱子內的雜質并創造一定的溶劑環境（注意整個過程不要使小柱干涸）。

2）、上樣--將樣品轉移入柱，此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出，雜質被保留在柱上，故此步驟要開始收集（注意流速不要過快）。

洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集，合并收集液（注意流速不要過快）.

淋洗通常需要干燥，原因是什么？

回答：淋洗液一般都要干燥，主要考慮以下因素：

1.通常因為反相萃取用于化合物的預處理，正如反相萃取在色譜中是一種常見的分離方法，反相萃取中的淋洗液通常是一種水相或含水的緩沖溶液，除去水分，從而便于后續的干燥、濃縮步驟。

2.有些項目，在淋洗步驟完成后，直接用一定量的洗脫液，如1 ml甲1醇洗脫，這個過程將洗脫和定容集進行一步處理，前者的處理必然會對洗脫步驟的定量結果產

三、就是溶劑互溶問題，當淋洗過程中使用的溶劑的極性與洗脫溶劑的極性相差很大時，就會產生1乳化分層，洗脫阻力大，洗脫液有被稀釋的危險等，從而導致洗脫效果不同，從而導致試驗結果的失敗。

離子交換固相萃取小柱方法開發中需要注意的問題。

離子交換固相萃取適用于可解離成帶電離子的化合物，其機理是利用帶電荷的目標化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。樣品基質可以是極性的，如水溶液，也可以是非極性的有機溶液，但在實際應用中以水溶液較多，包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。

常見反相鍵合硅膠吸附劑的類型

C18柱

C18是目前使用zui多的一種SPE柱，根據2003年的一項統計，在所有使用

的SPE柱中，C18柱占了56％左右。C18柱的主要官能團是十八烷基( octade-cyl),其主要作用力是非極性，第二作用力是極性、陽離子交換。在所有鍵合硅

膠SPE吸附劑中，C18柱的非極性吸附能力zui強。因此，強非極性化合物被C18

吸附后可能較難洗脫。C18難吸附極性非常強的分子，如碳水化合物( carbohy

-drates).C18一般被當作zui沒有選擇性或通用型的吸附劑，因為絕大多數有機分子或多或少含有非極性基團，C18可以從水溶液中吸附這些有機化合物。因此C18對于同時分離不同結構的化合物時較為適用。由于C18的選擇性較低，其zui終萃取物往往沒有其他選擇性高的填料那么干凈。在蛋白質純化中，C18柱是優1秀的除鹽工具，因為樣品中的鹽在C18柱上沒有保留。C18的極性副作用力比其他鍵合硅膠SPE吸附劑低許多，主要是碳鏈較長的原因。

實際的應用

可以說， SPE柱的原理和應用相當廣泛，今天小編就以乳制品中三聚1氰胺的測定為例，做了一個小小的實驗，參考 GB/T 22388-2008原乳及乳制品中三聚1氰胺的測定方法二[1]。該實驗采用了陽離子交換 SPE柱(PCX)，因為三聚1氰胺在化學結構上有三個胺基-NH2，因而更容易離子化。

本試驗用三聚1氰胺溶液在嬰幼1兒奶粉di一段中加入1.0 mg/kg，經處理后在液態溶液中測定，多次檢測結果為0.8~0.9 mg/kg，經過多次洗滌、淋洗后，多次使用，結果為0.6~0.7 mg/kg。

正相作用機理

正相模式是指SPE小柱固定相極性大于流動相極性的分離模式。主要是利用：

固相萃取材料極性表面與目標物極性官能團之間的極性相互作用。極性作用力的強度比非極性作用力要大，但比離子作用力小。常見的極性官能團包括羥基、胺基、巰基等。弱極性的基質環境有利于極性作用力的形成，因為弱極性溶劑沒有能夠與極性固定相形成氫鍵的官能團。因此，在SPE的正相萃取中，樣品基質多為弱極性的，如正己烷、二氯甲1烷、菜油等，而目標物大多含有極性官能團。