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發(fā)布時間:2020-12-31 05:16  
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組織研磨儀采用垂直振蕩,使研磨管內(nèi)冷凍的樣品與研磨球型號碰撞,產(chǎn)生的剪切力和撞擊力使組織完全破碎。
組織研磨儀的使用方法如下:1.需將待測的樣品經(jīng)過簡單切碎稱重后,放入50ml離心管中。5)將研磨轉(zhuǎn)速調(diào)到1800,設定研磨時間為90秒(可根椐樣品的研磨的難易程度來調(diào)節(jié),此數(shù)據(jù)是以銀杏為樣本得出)。2.然后加入兩粒15mm研磨珠,在高通量組織研磨儀上以1000 r/min研磨3分鐘,即可得到初步的農(nóng)殘檢測樣品。3.再經(jīng)過提取液分離、鹽類除水和吸附劑除雜之后,就可以得到清液,用于進一步的檢測分析。
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多樣品組織研磨儀與組織研磨儀兩者均為實驗室的常用的儀器工具,其主要適用于:研磨、細胞破碎、勻漿、材料分散、樣品混勻、材料分散、組織均質(zhì)、振蕩等。
應用范圍(區(qū)別-優(yōu)勢):可研磨樣品:
植物組織(根、莖、葉、花、果、種子等)
動物組織(大腦、心臟、肺、胃、胸腺、腸、淋巴、肌肉、骨骼等)
真菌細菌(酵母等)
食品藥品 (各類食品、藥片等)
易揮發(fā)樣品(煤炭、油頁巖、蠟制品等)
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DNA的粗提
1) 將高通量組織研磨儀研磨好的樣品取出于65℃水浴45min,中途間隔(輕柔)振蕩三次混勻;
2) 冷卻后加入等體積:易戊醇(24:1),輕柔顛倒混勻使乳化10min;
3) 7000g-8000g離心10min(18-20℃);
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中;
5) (根據(jù)需要可用氯放:易戊醇如上法重復抽提一次,吸取上清);
6) 加入與上清液等體積
7) 離心法沉淀DNA;
8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上,用Tip頭吸干乙醇;
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次;
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明,不要過度干燥;
11) 用50μlTE溶解沉淀,可用65℃水浴助溶,DNA粗提物可用于粗略PCR等。
利用高通量組織研磨儀對要進行DNA提取的植物樣品研磨的好處在于:研磨過程中,不會對植物組織造成破壞,可根據(jù)需要選擇干磨、濕磨及冷凍研磨,封閉式的樣品管,避免樣品交叉污染。
