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發布時間:2021-08-24 13:11  
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武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。此外,原位雜交還是顯示細胞亞群分布和動向及病原微生物存在方式和部位的一種重要技術。
基本原理是熒光標記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。
武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。3.固定液常用固定液有10%甲醛、4%多聚甲醛、冰醋酸-酒精混合液、Bouin氏固定液等。
探針的標記物可以是性同位素,也可以是非性生物素和半抗原等,性同位素中,3H和35S為常用,3H標記的探針半衰期長,成像分辨率高,便于定位,缺點是能量低,35S標記探針活性較高,影像分辨率也較好,而32P能量過高,致使產生的影像模糊,不利于確定雜交位點。尤其當待檢標本為陰性時,陽性對照片呈陽性反應可排除待檢標本假陰性的可能。
武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
同其他的生物技術一樣,原位雜交技術在其發展與應用的過程中會出現一些問題,但隨著原位雜交技術的不斷改進與完善以及檢測手段的改進,原位雜交技術的優越性越來越突出,其應用也會更加廣泛。,1986),在植物上早應用于小麥和栽培種的鑒定(余舜武等2001。
熒光原位雜交(Fluorescence In Situ Hybridization, FISH)技術問世于20世紀70年代后期,其基本原理是利用標記了熒光素的核酸作為探針,按照堿基互補原則,與待檢樣本中與之互補的核酸經過變性-退火而形成雜交雙鏈核酸,通過熒光顯微鏡進行檢測和分析。
取材與標本固定
1. 取材 對于原位雜交所用的材料要盡可能新鮮,為了防止RNA的降解,取材要迅速,取材后要盡快固定或冷凍保存。
2.固定 進行原位雜交的組織或細胞必須經過固定處理,固定的目的是為了①保持細胞形態原有結構;②保存細胞內的DNA或RNA的水平;③使探針易于進入細胞或組織內。
3.固定液 常用固定液有10%甲醛、4%多聚甲醛、冰醋酸-酒精混合液、Bouin氏固定液等。這些固定液都有不同的優缺點因此要根據具體的實驗對象,選擇的固定液。
4.固定方法 組織標本取材后,迅速放入固定液中2~4h,取材組織大小為1cm×1cm×0.5cm,不宜太大。必要時,動物組織可進行灌流固定,然后將組織按要求取材放入20%蔗糖中,4℃過夜,次日可行冰凍切片。