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發布時間:2021-08-31 10:02  
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低溫生物菌種——菌種分離方法介紹
孢子分離又可分為以下幾種方法:
( 1 )褶上涂抹法:選取新鮮、健壯、未開傘、未裂破的子實體,洗凈后用75 %酒精表面滅菌2 分鐘,然后連同培養基一起放入接種箱內,經熏蒸消毒12 ~ 24 小時,再按無菌操作技術將接種環在子實體菌褶上涂抹,把涂抹后帶孢子的接種環在培養基上劃線接種,,后置于25 ~ 28 ℃恒溫箱內培養,可得純菌種。
( 2 )孢子印采集法:取滅過菌的載玻片、試紙或黑布,置于新鮮、未開傘或未開裂的子體菌褶的下方。經24 小時后,便落下孢子,形成印痕(即孢子?。H缓?,用接種環或玻璃棒蘸取孢子,接種在平面或斜面培養基上,進行恒溫培養,可得純菌種。
( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃鐘罩、培養皿、三角架、搪瓷盤等組成。鐘罩下為一搪瓷盤,直徑25 厘米左右,盤內先墊襯4~6 層紗布,中央放1 副9 厘米直徑的培養皿,大蓋口朝下,上放小的,口向上。然后,在上面小的培養皿上放1 只鉛絲繞成的三角架,再將帶孔的玻璃鐘罩蓋上,頂上罩孔用棉塞塞好,用紗布包好整個孢子收集器,置于高壓滅菌鍋或蒸籠內滅菌2小時。
孢子收集器滅菌消毒后,放入無菌室或無菌箱內。然后,用小刀割取1 塊4~5 厘米大小的子實體,插在收集器內的三角架頂上(若無孢子收集器,也可用培養皿代替)。再置于溫度24 ~26 ℃下培養24 小時,培養皿中便可見到白色粉狀物,此即為孢子。此時,可將孢子收集器再移至接種箱內,取出培養皿,蓋好,并在培養皿內加入10 ~ 20 毫升的無菌水,使孢子散于本中,成為孢子懸浮液。然后,再用無菌打針筒或吸管吸取孢子懸浮液,接種于試管斜面培養基上,每管注2 ~ 3 滴。置于24 ~ 26 ℃溫度下培養5 ~ 7 天,培養基上便可長出白色菌落。待菌落直徑有0 . 5 厘米時,選健壯的菌落,再移接于另一試管的斜面培養基上培養。當白色菌絲長滿試管時,便得純菌種。
低溫生物菌種——菌種分離方法
寄主分離法即從生長有某種真菌的寄主體上(如茯苓、木耳木段)取下木片,進行分離的方法。如木耳制種時,可選朵大、出耳多、質厚的耳棒(即長有木耳的木段)。采集后,削去耳根下的樹皮,將其橫斷面鋸成1 厘米厚的木片,在無菌條件下,切去無耳菌絲部分,留下有耳菌絲部分,浸入水中1 分鐘,取出再用無菌水沖去木片上的液體。然后,用解剖刀將木片切成0 . 5 厘米的小塊,放入斜面培養基內,置24 ~26 ℃下培養,及時淘汰雜菌,選取純菌絲進行移植培養,即得菌種。
低溫生物產品特性
自古以來生物的產品具有高選擇性、高轉化率和高轉化速度的特性,可以在常溫、低壓或中壓的發酵條件下進行生產。該產品還具有以下特點:
1、易工程化:采用通用性強的發酵工藝和設備,適應規?;a;
2、高度靈活:代謝對H?/CO/CO?沒有比例要求;
3、條件溫和:常溫、低壓或中壓等溫和條件下操作;
4、耐受性高:抗雜菌、對硫化物等常規雜質具有較強耐受性;
5、高經濟性:生產項目建設投資低,1-2年可收回建設投資,投資回報率高;
6、綠色生產:利用H?、CO和CO?氣體,固定二氧化碳, 節能減排降污染,能耗低,低水耗,環境友好。
微生物菌種的作用
刺激作物生
有些微生物肥料中的微生物還可分泌植物類物質、維生素等,刺激和調節作物生長發育。例如,固氮菌等能夠產生多種活性物質(生長素、環己六醇、泛酸、吡哆醇、硫胺素等),固氮菌培養物中可檢測到3-乙酸;熒光假單孢菌的所有菌株均能產生赤素和類赤素物質,部分菌株還能產生乙酸,少數菌株能合成生物素和泛酸;叢枝菌根真菌能誘導牧草植株產生細胞分裂素(CTK),改變脫落酸(ABA)與赤素的比例。
