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動物細胞培養

高速冷凍離心機在所有的細胞離體培養中，困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。

⑴血1清：動物細胞離體培養常常需要血1清。相對常用的是小牛血1清。血1清提供生長必需因子，如激1素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里，血1清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。

⑵支持物：大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用玻璃，塑料等作為支持物。

⑶氣體交換：二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養過程中不斷進行調節，不斷維持所需要的氣體條件。

經過了近十多年既漫長又短暫的發展，iPS細胞技術已經取得了舉世矚目的進展。一個個突破性的成果既給我們帶來了喜悅，也帶來了新的挑戰，細胞重編程有望迎來一個新的研究浪潮。盡管iPS細胞有著誘人的應用前景，然而，未來iPS細胞的研究也面臨著許多亟需解決的問題：

首先，效率問題。目前，誘導產生iPS細胞的率仍然很低，這與基因導人的方式整合位點、表觀遺傳學等多種因素有關。這已成為制約iPS從實驗室走向臨床的zui大瓶頸。因此，如何提高iPS細胞的制備效率仍是人們普遍關注的問題。

第二，安全性問題。現在誘導iPS細胞通常借助逆轉錄病毒為載體，將幾種癌基因轉入分化細胞誘導其成為iPS細胞，而這種方法就有可能會因為外源基因插入細胞基因組，干擾了內源基因的表達，從而誘發cancer。

細胞增殖是活1細胞的重要生理功能之一，是生物體的重要生命特征 ，是生物體生長、發育、繁殖以及遺傳的基礎。細胞增殖是指細胞在周期調控的因子下，通過DNA copy等反應，完成細胞分裂的過程。增殖檢測一般是分析分裂中的細胞數量的變化，進而反應細胞的生長狀態及活性，細胞增殖檢測主要分為四類：DNA合成檢測、代謝活性檢測、細胞增殖相關抗原檢測和ATP濃度檢測。

物質跨膜運輸的方式分為被動運輸和主動運輸兩種。

（1）被動運輸，是順著膜兩側濃度梯度擴散，即由高濃度向低濃度。分為自由擴散和協助擴散。

①自由擴散：物質通過簡單的擴散作用進入細胞。細胞膜兩側的濃度差以及擴散的物質的性質（如根據相似相溶原理，脂溶性物質更容易進出細胞）對自由擴散的速率有影響，常見的能進行自由擴散的物質有氧氣、二氧化碳、甘油、乙醇、苯、尿素、膽固醇、水、氨等。

②協助擴散：進出細胞的物質借助載體蛋白擴散。細胞膜兩側的濃度差以及載體的種類和數目對協助擴散的速率有影響。紅細胞吸收葡萄糖是依靠協助擴散。

（2）主動運輸：物質從低濃度一側運輸到高濃度一側，需要載體蛋白的協助，同時還需要消耗細胞內化學反應所釋放的能量。主動運輸保證了能夠按照生命活動的需要，主動選擇吸收所需要的營養物質，排出代謝廢物和對細胞有害的物質。各種離子由低濃度到高濃度過膜都是依靠主動運輸。能進行跨膜運輸的都是離子和小分子，當大分子進出細胞時，包裹大分子物質的囊泡從細胞膜上分離或者與細胞膜融合（胞吞和胞吐），大分子不需跨膜便可進出細胞。