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發布時間：2021-03-08 10:29
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低溫生物菌種怎么保藏
菌種保藏(culture preservation，culture collection)是指保持微生物菌株的生活力和遺傳性狀的技術。或經人工選育得到的變異型純種，使其存活、不丟失、不污染雜菌、不發生或少發生變異，保持菌種原有的各種特征和生理活性。基本原理是使微生物的生命活動處于休眠狀態，也就是使微生物的新陳代謝作用限制在低范圍內。干燥、低溫和隔絕空氣是保證獲得這種狀態的主要措施。有針對性地創造干燥、低溫和隔絕空氣的外界條件，就是微生物菌種保藏的基本技術。常用的方法有凍干保藏法、深低溫保藏法、液氮保藏法、礦油封藏法、固體曲保藏法、砂土管保藏法、瓊脂穿刺保藏法等。日常工作中，常選用4℃冰箱進行短時間的菌種保藏
微生物菌種需要呼吸嗎?
在任何情況下，只要是活的微生物細胞，就需要呼吸。只不過在不同的環境中和條件下，微生物的呼吸速率也不同。
對于好氧型異養微生物來說，如果溫度、水分、營養物質供給等條件合適，微生物的生長繁殖速度非常快，呼吸速率也非常高。如果外界因素變化，或某個條件不適合微生物生長，其生長繁殖速度就會降低，呼吸速率相應下降。
如果是微生物保藏菌種，通常會限制某些方面的條件來降低微生物細胞新陳代謝速率，如低溫、干燥、缺氧、缺乏營養等，其外在的表現就是呼吸速率降低。
但不管怎樣的保藏條件，只要是細胞，就總是會有新陳代謝活動的，也總是會有呼吸的，只是呼吸速率的高低問題。
所以，任何微生物菌種都需要呼吸。
如何對微生物菌種進行活化
1 定期移植法的菌種復蘇較簡單，直接轉接即可；
2 液體石蠟法保存的菌種在復蘇時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上，生長繁殖后，再重新轉接一次；
3 沙土管法保存菌種在復蘇時，在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養基上，長出菌落后再轉接一次。或取沙土粒于適宜的液體培養基中，增殖培養后再轉接斜面；
4 真空冷凍干燥法保存菌種在復蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱， 用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養基上，進行適溫培養；
5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇時，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止，約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養
6 液氮超低溫凍結法保存菌種復蘇與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇相似，從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養。
