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發布時間：2021-10-20 18:02
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現有的細胞培養基質膠的應用中會碰到哪些問題？
1）Matrigel（基質凝膠）很難處理, 只能在低溫條件下溶解, 而且，不同批次間的產品在性能上、品質上會有不同，即使來自同一個廠家也不可避免;
2）相對來說，建立的微環境并不十分穩定, 較佳培養時間一般不會超過5天，且售價并不便宜；
3）重組層粘連蛋白和纖連蛋白僅適用于某些類型的細胞, 非常不穩定且昂貴;
4）聚鳥氨酸通常與層粘連蛋白結合使用, 主要限于神經元細胞。
細胞培養基質膠（凝膠、基質凝膠）PD.即PhenoDrive，目前，該系列產品已經被已成功用于一系列細胞的單一培養和共培養中。⑤靜電紡納米纖維具有較高的比表面積和孔隙率，可增大傳感材料與被檢測物的作用區域，有望大幅度提高傳感器性能。每種PhenoDrive產品都經過專門設計，可以模擬適當細胞表型和功能所必需的細胞外基質的單獨成分，或者操縱細胞生長的周圍環境以提供模仿體內觀察到的環境。每個PhenoDrive的定制設計允許將其生物提示呈現給細胞以確保大效果。
PHENODRIVE是一類合成的仿生細胞基質, 能夠通過細胞外基質的特定生物配體, 對大多數細胞維持或影響其表型, 可用于細胞單培養或共培養。通過重組后的PHENODRIVE可以:
1 在2D培養耗材如培養板、培養皿或培養瓶的表面形成一層透明的薄膜;
2 對于懸浮細胞培養, 以通過將PHENODRIVE直接溶解在培養液中;
無論上面哪一種應用方式, 細胞均可以在較短的時間內形成類組織樣結構。
PHENODRIVE凍干粉末的使用方法：
與傳統的培養基質膠相比, 我們的合成基質膠使用過程極為簡單, 在室溫下即可實現重組使用, 這里就 PHENODRIVE的標準應用流程介紹如下:
由于PHENODRIVE 是以無菌凍干粉末狀態進行存儲的, 因此在使用時需要對其進行重組。該裝置采用了靜電紡絲控制參數，包括聚合物溶液的注入速度、工作距離、集氣管轉速、工作溫度文章來自于：genintech。實驗人員可以根據需求,取適量的粉末將其溶解進水、乙醇或培養液中, 這個過程非常簡單, 待其溶解后得到無色、透明液體經過濾后即可準備用于培養 , 這一過程即重組。重組后的液體可在-20℃ 的低溫下保存3至少3個月。
對于這類耗材表面的涂布應用, 通常建議將PHENODRIVE 凍干粉末溶解進75% 的乙醇中, 按要求的濃度進行重組, 將經過濾的重組溶液澆鑄在需要涂布的器皿表面,并在無菌的環境下讓其自然蒸發（建議紫外線照射的無菌環境下）, 待溶劑蒸發盡后, 即在器皿表面留下一層透明的薄膜,即完成涂布的過程。控制軟件：1通過與系統適配的控制軟件（通過USB端口連接），可對靜電紡絲納米纖維產品的多種參數進行控制。
建議：在無情況下種植細胞, 待細胞粘附后再添加, 比如在細胞種植3小小時后。
如果采用乙醇溶液進行重組, 應確保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重組步驟, 然后用移液器移取足夠的重組溶液將支架完全覆蓋, 同樣采用自然蒸發的方法在支架的表面及空期間形成一層透明的薄膜。
溶解待培養細胞類型的無組織培養基中的PHENODRIVE, 方法是按照粉末步驟配置適當濃度的重組透明重組溶液,再將從組后的溶液與細胞懸浮液混合, 以達到0.001% ~1%（V/V）的終 PHENODRIVE 濃度。靜電霧化與靜電紡絲的區別在于二者采用的工作介質不同，靜電霧化采用的是低粘度的牛頓流體，而靜電紡絲采用的是較高粘度的非牛頓流體。細胞懸浮液的典型細胞濃度是40000個/ml ~1000000個/ml。
