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發布時間：2021-10-20 02:46
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低溫生物菌種——菌種分離方法介紹
孢子分離又可分為以下幾種方法：
( 1 ）褶上涂抹法：選取新鮮、健壯、未開傘、未裂破的子實體，洗凈后用75 %酒精表面滅菌2 分鐘，然后連同培養基一起放入接種箱內，經熏蒸消毒12 ～ 24 小時，再按無菌操作技術將接種環在子實體菌褶上涂抹，把涂抹后帶孢子的接種環在培養基上劃線接種，，后置于25 ～ 28 ℃恒溫箱內培養，可得純菌種。
( 2 ）孢子印采集法：取滅過菌的載玻片、試紙或黑布，置于新鮮、未開傘或未開裂的子體菌褶的下方。經24 小時后，便落下孢子，形成印痕（即孢子印）。然后，用接種環或玻璃棒蘸取孢子，接種在平面或斜面培養基上，進行恒溫培養，可得純菌種。
( 3 ）孢子收集器采集法：孢子收集器由玻璃鐘罩、培養皿、三角架、搪瓷盤等組成。鐘罩下為一搪瓷盤，直徑25 厘米左右，盤內先墊襯4～6 層紗布，中央放1 副9 厘米直徑的培養皿，大蓋口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培養皿上放1 只鉛絲繞成的三角架，再將帶孔的玻璃鐘罩蓋上，頂上罩孔用棉塞塞好，用紗布包好整個孢子收集器，置于高壓滅菌鍋或蒸籠內滅菌2小時。
孢子收集器滅菌消毒后，放入無菌室或無菌箱內。然后，用小刀割取1 塊4～5 厘米大小的子實體，插在收集器內的三角架頂上（若無孢子收集器，也可用培養皿代替）。再置于溫度24 ～26 ℃下培養24 小時，培養皿中便可見到白色粉狀物，此即為孢子。此時，可將孢子收集器再移至接種箱內，取出培養皿，蓋好，并在培養皿內加入10 ～ 20 毫升的無菌水，使孢子散于本中，成為孢子懸浮液。然后，再用無菌打針筒或吸管吸取孢子懸浮液，接種于試管斜面培養基上，每管注2 ～ 3 滴。置于24 ～ 26 ℃溫度下培養5 ～ 7 天，培養基上便可長出白色菌落。待菌落直徑有0 . 5 厘米時，選健壯的菌落，再移接于另一試管的斜面培養基上培養。當白色菌絲長滿試管時，便得純菌種。
什么是低溫生物菌種？
低溫生物菌種又稱生物肥料、接種劑或菌肥(bacterial manure)等，是指以微生物的生命活動為核心，使農作物獲得特定的肥料效應的一類肥料制品。微生物肥料和微肥有本質的區別：前者是活的生命，而后者是礦質元素。微生物資源豐富，種類和功能繁多，可以開發成不同功能、不同用途的肥料。而且微生物菌株可以經過人工選育并不斷純化、復壯以提高其活力，特別是隨著生物技術的進一步發展，通過基因工程方法獲得所需的菌株已成為可能。巨大芽孢菌、膠質芽孢菌、固氮芽孢菌、球形芽孢菌、側孢短芽孢菌等被廣泛用于生產生物肥料。
低溫生物菌種的存儲及施用規范
儲存和施用技術嚴格
溫度、光照、酸堿度和滲透壓等環境因素都能影響到微生物的存活。儲存微生物肥料應選擇避光、低溫環境條件。施用微生物肥料應防止長時間暴露在陽光下，以免紫外線殺滅肥料中的微生物；微生物肥料不應直接與化肥混合施用，以免因滲透壓的改變而抑制或殺滅其中的有效菌等。
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