丹東二醇基SPE柱品牌服務介紹「碩譜生物」

廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國內生產SPE小柱較好的生產廠家。二醇基SPE柱品牌

為何在 SPE操作中會出現流速非常慢或流速不一致，回收率較低，且平行性差？也許很多小伙伴都遇到過這樣的問題。小子選錯了，方法有問題嗎？或者填充材料的粒度分布不均勻，填充松緊度不穩定？實際上 SPE小柱每批流速都有嚴格的質量控制范圍，在質量控制范圍內的小柱可以保證穩定的流速，超出質量控制范圍的小柱將作為異常品處理。那么，是否可以采用一種穩定的方法，用出廠流速測試合格

實際上還有一個很容易被大家忽視的細節也會導致流動速度過慢： SPE小柱在運輸過程中篩板和填料可能會發生微小的松動，導致空氣進入填料(一般不容易被肉眼看到)，含氣填料在氣壓下會導致溶劑流動緩慢。這一點大家都能理解，為什么同一批小柱子會出現流速不平衡的情況

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正壓除氣泡

試樣數量較少，填充量較小，人工施加正壓較為方便，可采用針筒連接接頭法進行正壓排除氣泡。

□負壓排泡

試樣量較大，填料量大，人工施加正壓不便，可用真空泵連接固相萃取裝置，負壓排出氣泡。

1.2排氣泡的時間？

在 SPE操作中，一般包括平衡活化、上樣、淋洗、洗脫四步。是否每個步驟都需要一個排氣泡？但是，一般情況下，當填料之間有空隙時，需要排出氣泡，例如，當平衡液被激1活后，需要排出氣泡，使溶液能更好地與填料接觸。

另外還有一個容易忽略的環節也是需要排出氣泡的，一般淋洗后需要進行抽干操作，抽干后填料間也會有空氣進入，加入洗脫液后，也是要排出氣泡的，否則大量的氣泡也會嚴重影響洗脫液的流速和洗脫效果。

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預處理溶劑和參數的選取：確定預處理 SPE柱所用溶劑及其用量和流速，并進行平衡。在反相或離子交換柱中，通常以或極性為預處理溶液，以水或緩沖溶液為平衡溶液。通常采用洗脫溶劑或非極性對正相柱進行預處理。

預處理和平衡溶液過柱流速的要求并不很高，只要能保證官能團的碳鏈得到有效拉伸，填充物達到接收樣品的平衡狀態即可。

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樣本過柱流速度的選擇:下一步是確定樣品通過 SPE柱流動速度。過柱流速與 SPE試樣中填充粒子的大小和尺寸分布、填充粒子的密度、目標化合物與試樣基質的結合程度、試樣的粘度等因素有關。

一般情況下，100 mg填料的反相硅膠柱流速控制在2~l0mL/min之間。離子交換法萃取時，為了保證目標化合物有足夠的時間與 SPE柱填料中的離子交換官能團作用，應適當降低樣品通過 SPE柱的速度，因為它們的相互作用需要比非極性作用力更多的能量，因此應適當降低樣品穿過 SPE柱的速度，一般控制在1.5~5 mL/min。

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清洗與干燥參數選取：若目標化合物為中性化合物，且選擇了疏水性的非極性填料(如C4、C8、C18等)，則可用水或柱子平衡的緩沖液清洗。若分析物對固相萃取柱的吸附能力較強，則可在洗滌液中加入水溶性，提高洗滌效果。

當發現回收率下降時，收集該組分，并檢測目標化合物是否在這一階段被洗脫。若經調整 pH使可離子化目標化合物中性化，并通過疏水力被 SPE柱吸附，則必須注意洗滌時 pH保持不變，以免由于 pH的變化而導致目標化合物在洗滌過程中丟失。

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若目標化合物為陰或陽離子(如采用 SAX、 PSA、NH2、 SCX、 CBA和 PRS等離子交換柱萃取)，可用柱平衡的緩沖液清洗。對帶單電分析物，緩沖液的離子強度不能超過50 mmol/L。對帶雙電的分析物，緩沖液的離子強度不能超過10 mmol/L。

水份的存在對特定環境中目標化合物的洗脫及后續分析有一定的影響。所以 SPE柱必須先干燥，然后才能洗脫。烘干方法通常采用正、負壓力。

正壓法通常是將帶一定壓力的空氣或氮氣從 SPE柱上吹走填料中的水；負壓法則是將一定真空度從萃柱下吹走殘余的水。有時候，為了更好地去除殘余的水份，可以使用量的極性，比如50μ L。若目標化合物易揮發，要注意控制正壓/負壓除水時間，避免在干燥過程中造成損失。