臨床前動物實驗常規及特殊染色「在線咨詢」

動物模型的設計原則

適用性和可控性

供醫學實驗研究用的動物模型，在時，應盡量考慮到今后臨床應用和便于控制其疾病的發展，以利于研究的開展。如雌能終止大鼠和小鼠的早期，但不能終止人的。因此，選用雌大鼠和小鼠終止早期的模型是不適用的，因為在大鼠和小鼠篩選帶有雌活性的時，常常會發現這些能終止，似乎可能是有效的避孕藥，但一旦用于人則并不成功。所以，如果知道一個化合物具有雌活，用這個化合物在大鼠或小鼠觀察終止的作用是沒有意義的。又如選用大小鼠作作實驗性腹膜炎就不適用，因為它們對革蘭氏陰性細菌具有較高的抵抗力，很不容易造成腹膜炎。有的動物對某致病因子特別敏感，極易，也不適用。為了增加所動物疾病模型與人類疾病的相似性，應盡量選用各種敏感動物與人類疾病相應的動物模型，可參考相關文章《各種敏感動物與人類相似的疾病模型》。如狗腹腔注射糞便濾液引起腹膜炎很快（ 80$ 小時內），來不及做實驗觀察，而且糞便劑量及細菌菌株不好控制，因此不能準確重復實驗結果。

方法SD大鼠30只,采用隨機數字表法隨機分成5組每組6只:正常對照組(Control組),生理鹽水組(NS組),尼古J3 mg. kg-1.d-1組(NT3組),尼古丁9mg-kg-1.d-1組(NT9組)和尼古丁18 mg.' kg-1. d1組(NT18組),.分別不zhu射,皮下zhu射生理鹽水,尼古丁1 mg/kg,3 mg/kg和6

mg/kg,3次/d,連續7d.末次注射后60 min皮xia注射美加明1 mg/kg.觀察大鼠注射尼古J期間和戒斷后體重變化,存活情況和古丁戒斷評分另外選取Control組NS組和NT9組各6只大鼠測定右下肢足底MWT和TWL.結果與NT3組比較,注射尼古丁后第7天.NT9組和NT18組大鼠體重增加緩慢[(3.8 1.3),(2.0 0.3)g vs (7.2 1.0)g](P <0.05),戒斷后di1天和第2天大鼠體重增加迅速(P <0.01).NT9組和NT18組大鼠美加明激發后出現更多的戒斷癥狀(P<0.01,.NT18組大鼠si亡率為17%.與Control組比較.NT9組大鼠在尼古J戒斷后MWT與TWL明顯降低(P <0.01).結論間斷皮xia注射尼古J9 mg-kg-1.d-17 d可以成功制作改良尼古J依賴戒斷大鼠模型,尼古J戒斷后大鼠疼痛敏感性加高.

小鼠膀胱ai原位瘤動物模型建立方法

膀胱灌注法通常采用對數生長期的MB49小鼠膀胱ai細胞株作為實驗材料，6-12周齡的雌性C57/BL6小鼠作為實驗動物。- -般膀胱內灌注數量為:10^4-5*10^5個，10^4-10^5個， .5x10^6-4x10^6個。實驗中常通過導管對經過膜處理后膀胱灌入細胞懸液--定時間后使細胞粘附于膀胱壁上，建立起小鼠原位膀胱ai模型。該方法簡便有效，成瘤率相對較高。但是在膀胱粘膜完整的情況下，發癌率- -般只有10%。為提高其移植成功率，研究者通常采用膀胱粘膜損傷技術進行膀胱灌注。常用的膀胱損傷技術有電灼法，酸性溶液和胰蛋白酶灌注法(17-19)。應根據動物的種類、身體大小、生活習性、實驗目的等選擇具適當防護水平的、專用于動物的、符合國家相關標準的生物安全柜、動物飼養設施、動物實驗設施、消毒設施和清洗設施等。該方法成瘤率高，具有很強的實用性，但是膀胱ai模型插管要求高，腫liu細胞容易外滲，并且膜損傷處理過后易發生膀胱內發炎現象。

大鼠燙l傷動物模型

方法  按30mg/kg體重的劑量經腹腔注射3％戊巴l比妥鈉麻l醉大鼠，根據體重腹部備皮，然后固定于實驗臺上。將大鼠移近加熱自來水的燒杯，將紗布條浸入熱水中，待水溫恒定于99℃時，取出紗布，立即平鋪于待燙部位，以紗布接觸大鼠皮膚后計時。

(2)模型特點  大體觀察：致傷3s大鼠局部皮膚發紅、輕微水腫。愈合后毛發生長良好，有少量紅褐色色素沉著，皮膚輕微攣縮，表皮光滑。致傷10s大鼠局部皮膚發白、水腫。愈合后毛發生長良好，皮膚瘢痕形成，表面粗糙不平。光鏡觀察：致傷3s大鼠表皮層次尚清楚，細胞明顯腫脹、變性，層次結構尚清楚，細胞核結構不清。表皮內有水皰形成，真皮水腫、間質疏松，膠原纖維斷裂，嗜酸性染色性能減退，呈嗜雙色性。血管擴張、充血，皮脂腺、汗腺腺上皮細胞及毛囊上皮細胞尚清楚，部分腫脹、溶解。皮下組織中血管擴張、充血。致傷10s大鼠表皮細胞部分脫落，結構不清，明顯變性、壞死，部分細胞已溶解。制備小胃是將動物的胃分離出一小部分，縫合起來形成小胃，主胃與小胃互不相通，主胃進行正常消化，從小胃可收集到純凈的胃液。表皮內有水皰形成，真皮層間質疏松、充血，膠原纖維融合成片，嗜酸性染色性能減退，呈嗜雙色性，大部分皮脂腺、汗腺、毛囊被破壞，結構不清，真皮深部可見殘余毛囊。皮下組織血管擴張、充血l、水腫明顯，結構未破壞。上述結果表明，致傷3s大鼠為淺Ⅱ度燙l傷，致傷10s大鼠為深Ⅱ度燙l傷.