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發布時間:2021-10-15 10:56  
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蛋白質結晶涉及四個重要步驟
1. 蛋白質純度的確定。如果不夠非常純,必須要進一步純化。
2. 蛋白質溶解于合適的溶劑中,從中它能通過一種鹽或有機化合物而析出。溶劑通常是水-緩沖劑溶液,有時加,如2--2,4-(MPD)。正常情況下,沉淀劑也被加入,但是濃度不高于使沉淀產生。對于不溶于水-緩沖劑或水-的膜蛋白,還需要加入去污劑。
3. 使溶液過飽和。在這一步中,小聚集體形成,它是晶體生長所需的核。對小分子的結晶來說,相比于蛋白質更為人熟知,晶核的自發形成需要提供表面張力能。一旦這個能障被突破了,晶體開始生長。能障在高水平的過飽和度時很容易克服。因此,在高過飽和度時,晶核更易自發形成。晶核的形成可作為一個過飽和度和其他參數的函數通過多種方法來研究,包括光散射、熒光去極化及電子顯微鏡。
4. 一旦晶核形成,晶體生長正式開始。對低分子量的化合物而言,新分子會逐步結合到正在生長的晶體表面。這是由于這些位置的結合能比較大,相對于分子結合到平滑的表面。這些步驟要么由晶系缺陷造成,要么發生在表面隨機形成的晶核。
蛋白結晶板過程
概括了蛋白質結晶的基本過程,闡述了蛋白質結晶的早期發展歷程,重點介紹了蛋白質結晶的近期研究狀況,主要包括:形核機理的研究,結晶條件的篩選和結晶技術的優化以及基于結構的設計技術.特別是對離子液體在蛋白質結晶過程中的應用及發展前景進行了討論,
論述了國內外生物大分子(蛋白質,酶等)沉淀結晶的研究現狀和進展,著重從結晶熱力學,粒子聚集,結晶的成核與晶體生長,以及場的作用等方面闡述了蛋白質沉淀結晶過程的特定現象與可能的結晶機理,對蛋白質的沉淀結晶過程作了的描述,并提出未來研究方向,為蛋白質結構分析,新藥設計,生化研究以及工業化生產提供一定的基礎。
蛋白質晶體板介紹使用
通過紅外光譜,掃描電鏡,X射線衍射對產物的晶型,形貌及物相進行了詳細表征,初步探討了文石晶體形成機理及生長機理。本文研究的主要內容及所獲得的結論如下:1.常溫常壓下,以竹蟶韌帶纖維狀蛋白質為基底,采用氣體擴散法可以在較大的條件范圍內合成出純文石晶體:即稀硫酸濃度0.1mol-L-1,NH4HCO3粉末19.0g,CaCl2濃度0.9-9.0mmol·L-1,溶液高度10-30mm,反應溫度20-30℃,結晶時間3-12小時。而空白對照(以玻璃蓋玻片為基底)制備出的晶體主要為菱形方解石,還有少量文石和球文石。