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PCR實驗室的設計原則

使用實時熒光PCR儀，擴增區(qū)、擴增產物分析區(qū)可合并；

采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀，則標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產物分析區(qū)可合并。

PCR實驗室工作基本原則

1.進入各工作區(qū)域應當嚴格按照單一方向進行

試劑儲存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→ 擴增產物分析區(qū)。

2.各工作區(qū)域必須有明確的標記，不同工作區(qū)域內的設備、物品不得混用。

PCR實驗室注意事項——擴增產物分析區(qū)

核酸擴增后產物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法、直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法、質譜分析等。

由于紫外照射的距離和能量對去污染的效果非常關鍵，因此可使用可移動紫外燈（254nm波長），在工作完成后調至實驗臺上60～90cm內照射。

PCR實驗室注意事項——標本制備區(qū)

為避免樣本間的交叉污染，加入待測核酸后，必須蓋好含反應混合液的反應管。對具有潛在危險性的材料，必須在生物安全柜內開蓋，并有明確的樣本處理和滅活程序。

PCR實驗室注意事項——擴增區(qū)

為避免氣溶膠所致的污染，應當盡量減少在本區(qū)內的走動。必須注意的是，所有經(jīng)過檢測的反應管不得在此區(qū)域打開。

核酸擴增后產物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法、質譜分析等。

PCR實驗室布局

實驗室的氣流也應從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū)，不得逆向流動。各工作區(qū)頂部應安裝紫外燈，紫外燈的波長為254nm，每20㎡一支40W的紫外燈。

PCR實驗室又叫基因擴增實驗，PCR是聚合酶鏈式反應簡稱。是一種分子生物學技術，用于放大特定的DNA，可看作生物體外的特殊DNA。通過DNA基因追系統(tǒng)，能迅速掌握生物體內的病毒含量，其精準度高達納米級別。

PCR實驗室布局

PCR實驗室原則上為試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增產物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域并設有專用走廊，各工作區(qū)域應設緩沖間，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。

不同功能的工作區(qū)應是分隔獨立的，各工作區(qū)有明顯的標志，不能直通，如果緊密相連，需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴增前區(qū)，后兩區(qū)為擴增后區(qū)，擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應嚴格分開。

PCR實驗室注意事項——擴增產物分析區(qū)

用過的吸頭也必須放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理，如焚燒。由于本區(qū)有可能會用到某些可致基因突變和有毒物質，故應當注意實驗人員的安全防護。