IP-WB活性檢測試劑盒服務至上「武漢紐斯特」

1.刺激的和非刺激的細胞裂解液

2.蛋白酶抑l制劑

3. 4°C管搖桿或搖床

4. 0.5 M EDTA，pH8.0

5. 1 M氯化鎂

6. 2倍還原SDS-PAGE樣品緩沖液

7.電泳和免l疫印跡系統

8.免l疫印跡洗滌緩沖液，例如TBST（10 mM Tris-HCl，pH 7.4，0.15 M NaCl，0.05％

吐溫20）

9.免l疫印跡封閉緩沖液（TBST包含5％脫脂奶粉或3％BSA）

10. PVDF或硝l酸纖維素膜

11.二抗

12. ECL檢測試劑

Arf樣蛋白1（Arl1）是GTpases的Ras超家族中的調控性GTPases Arf家族的成員，并且在整個真核生物中都具有高度保守的直系同源基因。 Arl1對果蠅和秀麗隱桿線蟲的早期胚胎發育至關重要。 Arl1在主要序列，細胞定位和功能（膜運輸調節）上與Arf1-6較相似，甚至共享幾個共同的結合伴侶。 除了其在高爾基體/反式高爾基體網絡中的膜運輸功能中，還有報道表明Arl1在酵母中的離子穩態中可能發揮作用。

Arf6激l活測定。 經GDP（lane1）或GTPγS（lane 2）處理后，純化的Arf6蛋白被免l疫沉淀。 用抗活性Arf6單克l隆抗l體進行免l疫沉淀。

分析原理

基于構型特異性抗Gα13-GTP的NewEast生物科學Gα13活化檢測試劑盒從細胞提取物或體外檢測活性Gα13-GTP水平的單克l隆抗l體GTPγS負載Gα13活化試驗。簡單地說，抗活性Gα13小鼠單克l隆抗l體用含有Gα13-GTP的細胞裂解液培養。結合的活性Gα13將被蛋白質A/G瓊脂糖。用兔抗α13多克l隆抗l體免l疫印跡法檢測沉淀的活性Gα13。

Gα13活化試驗。MEF細胞分別用LPA（第2道）或不加LPA（1道）處理。細胞裂解物用抗活性Gα13單克l隆抗l體（Cat）孵育。#26902）（頂面板）。這個用抗Gα13兔多克l隆抗l體（Cat）免l疫印跡法檢測沉淀活性Gα13#21005年）。底部的面板顯示了用抗Gα13的細胞裂解物的Western blot（5%在頂部面板中使用的）。