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發(fā)布時(shí)間：2021-01-20 16:49
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三羥（Tris）作為一種常用的生物緩沖劑，因它的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，反而有活性，易于參與反應(yīng)，所以我們可以通過它的分子結(jié)構(gòu)制備出與它相關(guān)的產(chǎn)品。如Bis-Tris, Tricine，TES，TAPS等均為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常使用的緩沖劑，它們的分子結(jié)構(gòu)中都含有Tris的分子結(jié)構(gòu)。它也常被用作RNA雜交和DNA裂解的緩沖液。在Tris的使用中，需要注意：Tris緩沖液的pH值受溫度和濃度影響很大，因此在配制過程中要考慮使用環(huán)境。且來看看它在Bis-Tris, Tricine，TES，TAPS中如何發(fā)揮它的潛能的。
提到緩沖液就不得不延伸一下，這就是Henderson-Hasselbalch方程。
在前面提到，
將等式同時(shí)取對(duì)數(shù)，并簡(jiǎn)化就可以得到：
或者
這就是Henderson-Hasselbalch方程。
注意：式子中酸及其共軛堿的濃度都是平衡時(shí)的濃度，除了酸性過于強(qiáng)的情況下，由于同離子效應(yīng)的存在，一般都可用此式計(jì)算。
TBST緩沖液 TBST中含有Tris-HCl，NaCl，tween20這三種物質(zhì)，是做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液。目的是洗掉非特異性吸附的蛋白質(zhì)，并且維持一個(gè)接近的天然環(huán)境。其中，Tween是一種離子表面活性劑，可加速非特異性結(jié)合的分離。因?yàn)閃estern Blotting中所用的膜可以與蛋白質(zhì)結(jié)合，孵育過程中，能夠與膜非特異性結(jié)合。為了防止以后曝光造成膠片背景太高，在孵育后，混有Tween 20的TBS 能夠?qū)⒎翘禺愋越Y(jié)合的洗掉，增加特異性。
