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發布時間:2021-08-28 07:26  
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ELISA試劑盒的用途
ELISA的基礎是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或仍保持其活性,酶標記的抗原或既保留其活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定。
然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。
Elisa試劑盒操作步驟
1.用蓋片鑷Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片完全浸在培養液中;
5.將Elisa試劑盒培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。
Elisa試劑盒的注意事項
Elisa試劑盒是否滅活:加熱可滅清中補體系統,在較少數情況下(培養ES細胞,平滑肌細胞時)建議滅活,在培養其余細胞時不建議滅清。滅活非常容易產生沉淀,如必須滅活請按56℃,30 min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產生沉淀。
Elisa試劑盒培養基:無培養基在結果重復性、細胞體外分化方面有優勢,但是,仍然是培養液中基本的添加物,尤其是在原代培養或細胞生長狀態不良時,常常會先使用有的培養液進行培養,待細胞生長旺盛后再換成培養液。