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發(fā)布時間：2021-10-19 05:51
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凍存袋技術
是將細胞放在低溫環(huán)境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。
細胞凍存的操作步驟
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血的凍存培養(yǎng)液；
2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；
4. 離心1000rpm，5min；
5. 去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調節(jié)凍存液中細胞的密度為5×106/ml～1×107/ml；
6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。
凍存袋簡介
屬于醫(yī)院器械領域,涉及一種適合細胞回輸用的細胞凍存袋,即生物樣品存儲袋,包括:一存儲袋袋體和與其逐一并排排列的2~6個第二存儲袋袋體;一和第二存儲袋袋體之間,以及各個第二存儲袋袋體之間設置袋體間連接管路;一存儲袋袋體上沿設置一輸入口并通過該輸入口與連接管的一端連接,生物樣品經由連接管并通過輸入口進入一存儲袋袋體;一存儲袋袋體上沿設置一取樣口,各個第二存儲袋袋體上沿設置第二取樣口,一取樣口和第二取樣口用于將存儲在袋體內的生物樣品取出.本存儲袋能夠方便地用于對生物樣品例如臍帶血造血千細胞,血漿等處置,存儲,冷凍,復蘇以及直接給患者回輸生物樣品特別是造血細胞.
