隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。液相色譜儀成為解決生化分析問題有前途的方法。由于液相色譜儀具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、研究、環境分析、無機分析等各種領域。接通載氣當色譜柱與進樣口接好后,通載氣,調節柱前壓以得到合適的載氣流速。液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。質譜連用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯和多核芳烴等,液相色譜儀連用也發展很快,如在環境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發烴類,使環境污染分析得到新的發展。液相色譜儀的維護與維修 ,液相色譜儀常見故障與排除方法 : 泵:單向閥 現象:柱壓波動范圍很大。原因:單元向閥污染或閥內進入氣泡引起。污染使得球與閥座密封不嚴,液流倒流,壓力不穩,或球與閥座粘在一起阻死。氣泡進入閥中會緊貼在閥體的一側,使球難以返回到閥座,引起倒流,使壓力和流速變化范圍大,有時甚至為零。措施:對于污染用不同極性的一系列溶劑沖洗有可能解決問題,如用25mL水依次沖洗。或拆下進出單向閥放在10%的液內超聲清洗30~60min,若仍不解決問題則要更換單元向閥。對于閥內進入氣泡不必弄清氣泡存在何處,只要打開泄液閥大流速沖洗就可解決問題,在沖洗泵時可用扳手迅速打開泵頭上的輸出管路,以促進氣泡排出。
購買的小技巧: 液相色譜儀等分析儀器都有相應的國家指標,所以我們購買液相色譜儀一定先看是否滿足標準,在選擇廠家以及型號方面多做對比,才能選擇出適合自己使用且性價比高的儀器。液相色譜儀的指標比較多,包括檢測器的、泵的等等,他的主要指標有漂移、定性定量重復性、小檢測濃度和噪音,下面我們就看看這幾項的選擇。色譜柱是進行色譜分析的主要儀器,色譜柱的正確安裝才能保證發揮其的性能和延長使用壽命。 我們先看漂移的指標,我們首先需要了解什么是漂移,漂移是指儀器穩定后一段時間內基線漂離原點的距離,通常用來衡量儀器穩定快慢,好的儀器會在很短時間就能穩定,提高分析效率。定性定量重復性主要是考核儀器穩定性的指標,這對于分析樣品來說是非常重要的,好的儀器其穩定性應該是十分的。小檢測濃度是和噪音成正比的,噪音越大,小檢測濃度就越大,靈敏度就越低,某些廠家回避了這個指標,說明他們不愿在小檢測濃度的基礎上去比較噪音。對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好,否則噪音過大將會導致基線不穩,甚至影響分析結噪音的大小直接關系到儀器的檢測靈敏度,噪音越大,檢測的靈敏度就越低。制備液相色譜儀的功能: 泵形式:串聯雙柱塞浮動式密封圈。 泵頭自沖洗功能。 “自吸式單向閥”技術,可延長密封圈使用壽命。這也是我們常說的液相色譜儀至少一周要開機一次的原因(我們做液相一定要有“微滲”的概論)。 程序化的溶劑類和壓縮因子,可自動補償。 完整的預清洗功能,更于快速溶劑更換。 制備液相色譜儀主要用于以下領域: 1、天然化學、中藥化學:這是國內目前廣泛的使用方法,為了弄清楚植物中的微量有效成分,開放手工色譜柱早已不夠用了,幾乎每個搞天然藥化的實驗室都至少有一臺液相,土豪實驗室人手一臺液相。 2、蛋白純化:相對于前者,蛋白純化的起步要稍微晚一點,但是發展很迅速。同時,由于外國儀器廠家在這個領域的優勢不算太大,目前國內也在這個領域加快發展,搶占地盤。 3、雜質純化:由于合成工藝并不能做到100%的產率,往往伴有副產品,如何獲得微量的雜質并確定結構和含量,這就得靠液相色譜。 4、手性化合物的制備:這個主要是有機合成和方法學的在用。