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親和柱的測定原理

親和柱，吸附力高柱容量大，適合于和HPLC、LC-MS及DON酶免分析試劑盒結合使用，定量檢測DON。適用于谷物、飼料等樣本中的DON凈化處理，提高了樣品的純度，純化后的提取液可用不同的分析方法測定。

測定的基礎是抗原反應，抗嘔吐毒素(DON)的連接在柱內凝膠介質上，樣品中的DON經過提取、過濾、稀釋，然后將樣品提取液緩慢通過DON親和柱，在親和柱內，DON與結合，洗滌液通過親和柱除去未被結合的雜質。之后洗脫DON，然后進行相關分析。

親和柱親和層析技術原理

IAC也是色譜技術的一種,可稱為色譜技術,是一種利用抗原特異性可逆結合特性的SPE技術,根據抗原的高選擇性,從復雜的待測樣品中提取目標化合物。主要原理是將與惰性微珠共價結合,然后裝柱,將抗原溶液過親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,然后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原,用適當的緩沖液和合適的保存方法,柱可以再生備用。其提純效率很高,通常只需一次就可達到1000～10000倍的純化效果(王澤永,2002)。

親和柱——親和層析的分離原理

生物體中許多大分子化合物具有與其結構相對應的專一分子可逆結合的特性，如抗原與抗體，酶與底物或抑制，與受體等，這種結合往往是專一的而且是可逆的，生物分子間的這種結合力稱為親和力，親和層析的分離原理簡單地說就是通過將具有親和力的兩個分子中的一個固定在不溶性的基質（也稱載體）上，利用分子間親和力的特異性和可逆性，對另一個分子進行分離純化。被固定在基質上的分子稱為配體，配體與基質共價結合，構成親和層析的固定相，稱為親和吸附劑，蛋白質的生物特異性可以幫助選擇特異性的配體，一般是目的蛋白質與配體結合而不吸附雜質。蛋白質吸附后再利用洗脫液的快速變換和加入競爭劑的方法進行洗脫。

親和柱——親和層析介紹

將具有特殊結構的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中，當要被分離的蛋白混合液通過層析柱時，與吸附劑具有親和能力的蛋白質就會被吸附而滯留在層析柱中。那些沒有親和力的蛋白質由于不被吸附，直接流出，從而與被分離的蛋白質分開，然后選用適當的洗脫液，改變結合條件將被結合的蛋白質洗脫下來，這種分離純化蛋白質的方法稱為親和層析。利用共價連接有特異配體的層析介質分離蛋白質混合物中能特異結合配體的目的蛋白或其它分子的層析技術。