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固相萃取柱的操作方法介紹

一、反相萃取柱操作

從極性基體中提取非極性的樣品

1、活化:以3-5毫升去離子水(或緩沖液)淋洗萃取柱并保持萃取柱濕潤

2、上樣:以合適的流速使樣品均勻通過萃取柱

3、清洗:以5毫升適當(dāng)極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱(常用的有純水,緩沖液,水/溶劑混合液)

4、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升非極性溶劑分批洗脫至收集容器

二、正相萃取柱操作

從非極性基體中提取極性的樣品

1、活化:3-5毫升非極性溶劑淋洗萃取柱

2、清洗:以5毫升適當(dāng)非極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱

3、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升極性溶劑分批洗脫至收集容器

三、離子交換萃取柱

提取帶電荷的樣品

1、活化:以3-5毫升去離子水/或低離子強(qiáng)度的緩沖液淋洗萃取柱

2、上樣:以較低的流速,使樣品均勻通過萃取柱

3、清洗:5毫升去離子水/或低離子強(qiáng)度的緩沖液淋洗萃取柱

4、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升高離子強(qiáng)度的緩沖液洗脫至收集容器

固相萃取柱的正確使用步驟是什么呢？

一、參考固相萃取柱的類型及應(yīng)用，選擇適當(dāng)?shù)奶盍项愋停缓筮x擇固相萃取柱的大小和填料量。

反相、正相和吸附類型的過程：被萃取樣品的質(zhì)量不超過柱中填料量的5%，也就是說，如果您用100毫克/1ml的固相萃取柱，分析物質(zhì)不超過5毫克。

離子交換過程：您必須考慮離子交換的容量：SAX和SCX其吸附劑容量為0。2毫當(dāng)量/克。

第二、選擇好萃取柱后，按步驟進(jìn)行萃取過程：正相類型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常用樣品所在的溶劑來預(yù)處理。離子交換填料將用于非極性溶劑中的樣品，其用3-5ml的去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來預(yù)處理。為了使固相萃取填料從預(yù)處理到樣品加入時(shí)都保持濕潤，允許大約1毫升的預(yù)處理溶劑在管過濾片（frit）或萃取片表面之上。如果樣品是從一個(gè)貯液管或過濾管引入固相萃取管，則多加入0。5毫升的預(yù)處理溶劑到1毫升的固相萃取管中，如果是2毫升到3毫升的萃取柱中，多加入4升到6毫升管中等等。這是為了保證在樣品加入之前萃取柱濕潤。如果在樣品加入之前，萃取柱中的填料干了，重復(fù)預(yù)處理過程。在重新引入溶劑之前，用水沖洗柱中緩沖溶液的鹽。

固相萃取柱淋洗系統(tǒng)怎么選擇

固相萃取SPE(Solide Phase Extraction) 是利用吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附,與樣品的基質(zhì)和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫,達(dá)到分離或者富集目標(biāo)化合物的目的。固相萃取實(shí)際上采用的是液相色譜的分離原理,分離模式主要包括反相、正相、離子交換和吸附。固相萃取所用的吸附劑與液相色譜常用的固定相相同,只是在填料的形狀和粒徑上有所區(qū)別。一般來講,固相萃取填料的粒徑分布較液相色譜柱中的要寬,而且固相萃取小柱是一次性消耗品。
　　固相萃取小柱的吸附劑通常裝填于聚烯柱筒底部,并由上下兩層聚烯或聚四氟乙烯篩板固定;也有96 孔形式的固相萃取小柱。固相萃取小柱的大小規(guī)格、吸附劑的種類及裝量都配有多種選擇。