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              安徽層析泵承諾守信【賽爾夫】

              發(fā)布時(shí)間:2020-12-19 02:43  

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              對(duì)色譜柱升至一恒定溫度,通常為其溫度上限。特殊情況下,可加熱至高于使用溫度10-20℃左右,但是一定不能超過(guò)色譜柱的溫度上限,那樣極易損壞色譜柱。當(dāng)?shù)竭_(dá)老化溫度后,記錄并觀察基線。初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升,在到達(dá)老化溫度后5-10分鐘開始下降,并且會(huì)持續(xù)30-90分鐘。當(dāng)?shù)竭_(dá)一個(gè)固定的值后就會(huì)穩(wěn)定下來(lái)。如果在2-3小時(shí)后基線仍無(wú)法穩(wěn)定或在15-20分鐘后仍無(wú)明顯的下降趨勢(shì),那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染。快速色譜使用的柱子一般是玻璃柱,柱直徑為3~10cm.長(zhǎng)度為7~15cm。遇到這樣的情況,應(yīng)立即將柱溫降到 40℃以下,盡快的檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問題。如果還是繼續(xù)的老化,不僅對(duì)色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。






              柱色譜法( Column chromatography)所用色譜管為內(nèi)徑均勻、下端縮口的硬質(zhì)玻璃管,下端用棉花或玻璃纖維塞住,管內(nèi)裝有吸附劑。色譜柱的大小,吸附劑的品種和用量,以及洗脫時(shí)的流速,均按各單體中的規(guī)定。吸附劑的顆粒應(yīng)盡可能保持大小均勻,以保證良好的分離效果,除另有規(guī)定外通常多采用直徑為0.07-0.15mm的顆粒。吸附劑的活性或吸附力對(duì)分離效果有影響,應(yīng)予注意。吸附劑的填裝 干法:將吸附劑一次加入色譜管,振動(dòng)管壁使其均勻下沉,然后沿管壁緩緩加入開始層析時(shí)使用的流動(dòng)相,或?qū)⑸V管下端出口加活塞,加入適量的流動(dòng)相,旋開活使流動(dòng)相緩緩滴出,然后自管頂緩緩加入吸附劑,使其均勻地潤(rùn)濕下沉,在管內(nèi)形成松緊適度的吸附層。操作過(guò)程中應(yīng)保持有充分的流動(dòng)相留在吸附層的上面。濕法:將吸附劑與流動(dòng)相混合,攪拌以除去空氣泡,徐徐傾入色譜管中,然后再加入流動(dòng)相,將附著于管壁的吸附劑洗下,使色譜柱表面平整。俟填裝吸附劑所用流動(dòng)相從色譜柱自然流下,液面將柱表面相平時(shí),即加試樣溶液。試樣的加入 除另有規(guī)定外,將試樣溶于層析時(shí)使用的流動(dòng)相中,再沿色譜管壁緩緩加入。注意勿使吸附劑翻起。或?qū)⒃嚇尤苡谶m當(dāng)?shù)娜軇┲小3S霉潭ㄏ嘤惺唷⒀趸X、蔗糖、淀粉等,常用流動(dòng)相為水、等各種。與少量吸附劑混勻,再使溶劑揮發(fā)去盡后使呈松散狀;將混有試樣的吸附劑加在已制備好的色譜柱上面。如試樣在常用溶劑中不溶解,可將試樣與適量的吸附劑在乳缽中研磨混勻后加入。洗脫 除另有規(guī)定外,通常按流動(dòng)相洗脫能力大小,遞增變換流動(dòng)相的品種和比例,分別分部收集流出液,至流出液中所含成分顯著減少或不再含有時(shí),再改變流動(dòng)相的品種和比例。操作過(guò)程中應(yīng)保持有充分的流動(dòng)相留在吸附層的上面。



              漏氣:

              漏液是從內(nèi)部向外漏,而漏氣則是外部了的氣體進(jìn)入液相色譜儀的流路內(nèi)部形成氣泡。下面按流路的方向逐個(gè)部件分析產(chǎn)生氣泡的原因和相應(yīng)解決方法。

              過(guò)濾頭:油液時(shí),在流路管中有不規(guī)則但持續(xù)的小氣泡產(chǎn)生,這時(shí)考慮的是流動(dòng)相有沒有脫氣(需要特別提醒即使是有了真空脫氣機(jī)也是要先超聲脫氣的,起碼可以減少脫氣機(jī)的工作壓力并提高工作效率),如果已經(jīng)脫砂壓力了氣,則要注意過(guò)濾頭的污染也會(huì)造成這種現(xiàn)象。處理方法比較簡(jiǎn)單,擰下過(guò)濾頭在稀中浸泡,超聲半小時(shí),洗凈后裝回去即可。2、親水性固定液常采用疏水性流動(dòng)相,即流動(dòng)相的極性小于固定相的極性,稱為正相液液色譜,極性柱稱正相柱,正相柱的底劑用低極性溶劑,洗脫劑用極性較強(qiáng)的溶劑。



              中壓液相色譜(MPLC)柱壓在5-20bar(或75-300psi)之間,廣泛用于實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)規(guī)模的生物制品(如動(dòng)物臟器提取液、濃縮液、體液、植物提取液、生物技術(shù)發(fā)酵液等--往往需要經(jīng)過(guò)濾膜作初級(jí)凈化)的處理,以提取或純化所需的產(chǎn)品。 高壓液相色譜(HPLC)是指柱壓一般大于20bar(或300psi)的“高壓(或)液相色譜”,通常指所用色譜柱的塔板數(shù)大于2000,一般是在2,000~20,000的范圍之間。手動(dòng)進(jìn)樣器首先檢查手動(dòng)進(jìn)樣器是否有滲漏,一般是由于污染使轉(zhuǎn)子磨損或用尖頭的針扎進(jìn)手動(dòng)進(jìn)樣器,劃傷了轉(zhuǎn)子。


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