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偏光顯微鏡物鏡的鑒別率

物鏡的鑒別率是指物鏡具有將兩個物點清晰分辨的能力，以兩個物點能清晰分辨的距離d的倒數表示。d愈小，表示物鏡的鑒別率愈高。

要明白鑒別率可以有一定的限度，這就要用光通過透鏡后產生衍射現象來解釋。物體通過光學儀器成象時，每一物點對應有一象點，但由于光的衍射，物點的象不再是一個幾何點，而是有一定大小的衍射亮斑。靠近的兩個物點所成的象一兩個亮斑如果互相重疊，則導致這兩個物點分辨不清，從而限制了光學系統的分辨本領一分辨率。顯然，象面上衍射圖象中央亮斑半徑愈大，系統的分辨本領愈小。

瑞利（Rayleigh）提出一個推測（又稱瑞利準則）：認為當A1′衍射花樣的值正好落在A2′衍射花樣的極大值時，A1、A2是可以分辨的，將此時定出的兩物點距離A1、A2作為光學統的分辨極限。θ0稱為極限分辨角。不言而喻，當θ＞θ0時是完全可分辨的，θ＜θ0時是不可分辨的。

由圓孔衍射理論得到：θ0=1.22λ / D

式中λ──入射光波長；

D──入射光的允許孔徑（透鏡直徑）。

因為θ0很小，所以由圖2-4得：

d′≈θ0=1.22λS / D

物鏡在設計時，總是使它滿足阿貝正弦條件的，即

ndsinu=n′d′sinu′

式中n和n′為物、象所在空間的折射率，成象總是在空氣介質中，故n′=1；u各u′分別為光線在物、象空間共軛點上的孔徑角；d和d′分別為物點、象點中心斑的間距。

考慮到顯微鏡中入射光并非都是平行光，有傾斜光線，對上式系數作適當的修正，所以式中nsinu就是物鏡的數值孔徑，因此，上式或者寫：d=0.5λ/N.A

因此表明：物鏡的數值孔徑愈大，入射光的波長愈短，則物鏡的分辨能力愈高。在可見光中，觀察時常用黃綠光（λ ≈4400A），則可使分辨能力提高25%左右

偏光顯微鏡物鏡中心調節方法

（1）觀察旋轉工作臺上的切片，在切片中找一小黑點，使位于目鏡十字線中心。

（2）轉動工作臺，若物鏡光軸中心O與工作臺中心不一致，黑點即離開十字線中心繞一個圓轉動。圓的中心S即為工作臺的中心。

（3）將小黑點轉至距十字線中心遠的1點處，旋轉物鏡座上兩個調節螺絲使小黑點自1處移至O-1直線的中點（即1點距十字線中心距離的一半）。

（4）如此循環進行上述三步驟可使物鏡光軸與旋轉工作臺中心重合。

在高倍鏡下看到標本后，把需要進一步放大的部位移至視野中心。上升鏡筒或下降載物臺約1.5厘米。將物鏡轉離光軸，在蓋玻片所要觀察的部位上滴一滴香柏油，把光闌升至。換上油鏡，小心調節粗準焦螺旋，使油鏡慢慢下降或慢慢上升載物臺，從側面觀察油鏡下端與標本之間的距離，當油鏡的下端開始觸及油滴時即可停止。從目鏡觀察，調節細準焦螺旋，直至看清標本物像。

觀察完畢，上升鏡筒或下降載物臺，將油鏡轉離光軸，用干的擦鏡紙輕輕地吸掉油鏡和蓋玻片上的油，再用浸濕的擦鏡紙擦拭兩三次，后用干凈的擦鏡紙再擦拭兩三次。

三觀察后的處理工作

清潔：顯微鏡上的污物（殘物或灰塵），用擦鏡紙擦干凈，若擦不干凈可蘸少許進行擦拭。

顯微鏡各部分的放置：擦完后，把物鏡轉離光軸，把反光鏡轉到與載物臺垂直的方向，以減少灰塵粘落上面，而后罩上鏡套，小心的放回鏡箱內，保存備用。

⒈光學部分的擦拭

順序：吸耳球吹――毛筆、刷子和羽毛輕刷――擦鏡紙輕擦——擦鏡紙蘸輕擦。

鏡頭表面發霉和發霧可用擦鏡紙蘸少量酒精混合液（3：7）輕擦。內表面發霉和發霧，一般無法清除，所以嚴防發生。

⒉機械部分的擦拭

用干凈的軟布擦拭，或用擦鏡紙蘸輕擦，不得用酒精和，因為這些試劑會侵蝕油漆，容易把油漆擦掉。

防潮、防塵、防腐蝕、放熱

顯微鏡的維護_新聞中心

顯微鏡的維護

1.必須熟練掌握并嚴格執行使用規程。

　　2.取送顯微鏡時一定要一手握住鏡臂，另一手托住底座。顯微鏡不能傾斜，以免目鏡從鏡筒上端滑出。取送顯微鏡時要輕拿輕放。

　　3.觀察時，不能隨便移動顯微鏡的位置。

　　4.凡是顯微鏡的光學部分，只能用特殊的擦鏡頭紙擦拭，不能亂用他物擦拭，更不能用手指觸摸透鏡，以免汗液玷污透鏡。

　　5.保持顯微鏡的清潔，避免灰塵、水及化學試劑的玷污。

　　6.轉換物鏡鏡頭時，不要搬動物鏡鏡頭，應轉動轉換器。

　　7.切勿隨意轉動粗準焦螺旋。使用細準焦螺旋時，用力要輕，轉動要慢，轉不動時不要硬轉。

　　8.不得任意拆卸顯微鏡上的零件，嚴禁隨意拆卸物鏡鏡頭，以免損傷轉換器螺口，或螺口松動后使低高倍物鏡轉換時不齊焦。

　　9.在使用高倍物鏡時，不要用粗準焦螺旋調節焦距，以免移動距離過大，損傷物鏡和玻片。

　　10.保持顯微鏡的干燥。

　　11.用畢后，必須檢查物鏡鏡頭上是否沾有水或試劑，如有則要擦拭干凈，并且要把載物臺擦拭干凈，按規定放好。

偏光顯微鏡的照明設備可分為以下兩種

??1． 透射式照明 ??透射式照明法分中心照明和斜射照明兩種形式： ??（1） 中心照明：這是的透射式照明法，其特點是照明光束的中軸與偏光顯微鏡的光軸同在一條直線上。它又分為“臨界照明”和“柯勒照明”兩種。 ??A． 臨界照明（Critical illumination）:這是普通的照明法。這種照明的特點是光源經聚光鏡后成像在被檢物體上，光束狹而強，這是它的優點。 ??B． 柯勒照明：柯勒是十九世紀末蔡司廠的工程師,為了留念他在光學領域的突出貢獻,后人把他發明的二次成像叫做柯勒照明. 柯勒照明克服了臨界照明的缺陷，是研究用偏光顯微鏡中的理想照明法。這中照明法不僅調查效果佳，并且是成功地進行顯微照相所有必要的一種照明法。光源的燈絲經聚光鏡及可變視場光闌后，燈絲像次落在聚光鏡孔徑的平面處，聚光鏡又將該處的后焦點平面處構成第2次的燈絲像。這樣在被檢物體的平面處沒有燈絲像的構成，不影響調查。此外照明變得均勻。調查時，可改動聚光鏡孔徑光闌的巨細，使光源充溢不同物鏡的入射光瞳，而使聚光鏡的數值孔徑與物鏡的數值孔徑匹配。一起聚光鏡又將視場光闌成像在被檢物體的平面處，改動視場光闌的巨細可控制照明范圍。此外，這種照明的熱焦點不在被檢物體的平面處，即使長時間的照明，也不致損害被檢物體。2004年蔡司公司又在傳統柯勒式照明基礎上推出了帶有反光碗的全系統復消色差照明技能，消除照明色差，增強光的還原性，從而進步分辨率，一起照明均勻而光效高。 ??（2） 斜射照明：這種照明光束的中軸與偏光顯微鏡的光軸不在一向線上，而是與光軸構成必定的角度斜照在物體上，因而成斜射照明。相襯顯微術和暗視野顯微術就是斜射照明。 ??2． 反射式照明 ??這種照明的光束來自物體的上方經過物鏡后射到被檢物體上，這樣物鏡又起著聚光鏡的效果。這種照明法是適用于非通明物體，如金屬，礦藏等。