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顯微鏡發展至這一階段,是光學技術的快速發展時期

顯微鏡發展至這一階段，是光學技術的快速發展時期，尤其是可控的電燈取代自然光使得顯微鏡的使用不再受自然環境以及地理位置的影響。另外由于電燈的多樣化，以及各種濾光鏡的運用，光學技術的進步，促使熒光顯微鏡、金相顯微鏡、偏光顯微鏡，倒置顯微鏡等多種類型顯微鏡得以面世。 三目生物顯微鏡（顯微鏡發展的第三階段3.0） 光學成像效果取得重大進展之后，人們將顯微鏡改善的重點放在了顯微圖像的獲取技術上。人們在雙目光路信號進行再次分光，形成三目觀察筒，然后將攝像安裝于三目觀察筒上以獲得顯微圖像。此后顯微影像逐漸成為人們記錄原始信息的重要手段。相比之前提及的顯微繪畫，這種獲取顯微畫面的方式更精準、更，更先進。也不能真正區分變異淋巴細胞、幼稚細胞、有核紅細胞等，只有鏡下仔細觀察和分類才能發現和區分。

視場光闌和孔徑光闌的功能及調節

視場光闌和孔徑光闌的功能及調節 關閉視場光闌，這時在視場中可以看到一個邊緣模糊的圓形或多邊形亮斑。旋轉集光器垂直調節旋鈕，逐漸降低集光器直到圓形或多邊形亮斑(實際上是視場光闌的像)的邊緣完全清晰。調節集光器上的兩個調中螺旋，把視場光闌的像調到視場的中央。逐漸打開視場光闌，使得視場光闌像的邊緣剛好消失在視場之外。 視場光闌的作用是控制標本照明區域的大小，阻止對于像的形成所不需要的光線進入標本，從而保護標本以免過熱受損。因此視場光闌的大小以開到正好使被觀察的物場完全照明為宜，當更換不同放大倍數的物鏡時，由于物場大小發生變化，就要重新調節視場光闌，但并不需要重新調中集光器。 孔徑光闌是決定顯微鏡像的分辨力和反差的重要光學部件之一。孔徑光闌的大小是根據所用物鏡的孔徑來決定的，當集光器的孔徑稍低于物鏡的孔徑，即物鏡孔徑的70％被光線充滿時，能夠達到的光學效果。因此當更換不同數值孔徑的物鏡時，就要根據物鏡數值孔徑的70％計算值，及時地調節集光器的孔徑光闌。還必須注意的是：像的亮度決不能用孔徑光闌來調節，而只能用調節變壓器或使用中密度濾光片來調節。激發濾光片及遏止濾光片如何組合使用應根據不同熒光標本的激發方法進行選擇，一般也可根據使用說明書推薦的配套方法進行選用。

粗調和細調系統在現代顯微鏡中像的聚焦

粗調和細調系統 在現代顯微鏡中像的聚焦通過上下移動載物臺而實現，鏡臺和鏡筒的位置固定不變，這樣不僅調節方便靈活，而且當較重的附件安裝在鏡筒上時不會影響聚焦。載物臺的上下移動通過精密的粗調和細調機械系統來完成，它的構造取決于鏡臺的類型。 在較小的鏡臺上使用一種可以進行粗調和細調的單一調節旋鈕，這個旋鈕倒轉時就起到細調的作用，旋鈕旋轉大約半圈就達到細調的終點；雙目生物顯微鏡除了具備雙目觀察筒外，得益于當時光學、電子技術、機械技術的發展，使得顯微鏡整體上有了較大的改進。當旋鈕進一步旋轉時將作為粗調而起作用。這種單一調節旋鈕適用于教學顯微鏡，它不僅操作簡單，而且完全可以保證，即使使用高放大倍數時也具有良好的聚焦。在中性和大型的顯微鏡臺上，粗調和細調是兩個同軸旋鈕，各自是獨立進行調節的。 同軸調節旋鈕的機械傳動系統，傳動系統終只會引起末端齒輪的細微傳動，因而起到細調的作用。齒輪系統傳動的結果，能夠引起末端齒輪較大幅度的轉動，因而起到粗調的作用。