小RNA表達載體誠信企業「友名生物」

人ELISA試劑盒的原理及優勢：

　　1、ELISA是以immune學反應為基礎，將抗原、antibody的特異性反應與酶對底物的有效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

　　2、由于抗原、antibody的反應在一種固相載體──聚苯乙1烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。

　　3、Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在immune學檢驗的各領域中。

　　4、ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血1清或血漿中的抗人類HEV病毒Mantibody ELISA檢測。

　　5、ELISA的基礎是抗原或antibody的固相化及抗原或antibody的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或antibody仍保持其immune學活性，酶標記的抗原或antibody既保留其immune學活性，又保留酶的活性。

轉移RNA

轉移RNA（tRNA）在蛋白質合成過程中負責轉運氨基酸、解讀mRNA遺傳密碼。tRNA占細胞總RNA的10%~15%，絕大多數位于細胞質中。tRNA由Crick于1955年提出其存在，Zamecnik和 Hoagland于1957年鑒定。

tRNA一級結構具有以下特點：

①是一類單鏈小分子RNA，長73~95nt（共有序列76nt），沉降系數4S。

②是含稀有堿基zui多的RNA，含7-15個稀有堿基（占全部堿基的15%~20%），位于非配對區。

③5′末端堿基往往是鳥piao呤。

④3'端是CCA序列，其中的腺苷酸常稱為A76，其3’—OH是氨基酸結合位點。

RNA試劑盒注意事項

所有相關器皿耗材都應為RNase-free產品，操作過程要小心，帶口罩、手套避免環境中RNA酶污染樣品。

RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之間，但這并不表示RNA不純，需電泳檢測。

使用時一定要根據自己的實驗需要購買專1用提取試劑盒， 如果不是專1用試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質量以及完整性，會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護分析、分子克1隆等后續實驗的結果。

當前提取效果好的是RNA提取試劑盒，但其售價較高，單次實驗費用花費太大，對精度要求不高的實驗沒有必要購買，當然還有其它的進口試劑盒，但是均存在價格高、訂貨周期長的問題（如果碰上國內無貨的時候，要從國外發貨，會等很長一段時間）。普通的提取實驗用國產的試劑盒就足以，價格不高，基本上各地均有現貨，如天根（國內生產的試劑盒中銷售面比較廣的一種）等，其價格比進口試劑盒要便宜許多，且效果還不錯，還可以

回收產物的檢測

1.紫外分光光度計法檢測DNA在OD260處有明顯吸收峰，當OD260=1時，相當于大約50 ng/μL雙鏈DNA、40 ng/μL單鏈DNA。OD260/OD280≈1.6~1.9時，說明DNA純度較高。若洗脫時不用洗脫緩沖液，而是用去離子水，會使比值偏低，因為離子的存在會影響吸光度。但不表示純度低。

2.SYBR法檢測取回收產物1 μL，與1 μL SYBR染料混勻，于熒光透1視儀下觀察是否有黃綠色熒光。

3.瓊脂糖凝膠電泳法檢測取回收產物5 μL，與10×Loading Buffer混勻，DNA Marker加5 μL，電泳后凝膠成像觀察。5 μL DNA Marker相當于每個條帶50 ng DNA，觀察目的條帶亮度大致為Marker的兩倍，則大致估算其濃度約為20 ng/μL。