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              發布時間:2021-08-23 06:50  

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              常規除氣方法1.吹氦脫氣。使用氦氣在液體中溶解度低于空氣這一特性,在0.1 MPa壓力下,大約60 mL/min的流速通入流動相儲液容器10~15 min,就能有效地將溶解的空氣從流動相中排除,可有效排除80%的氧氣。利用一種的分布式噴射裝置,一體積中的氦氣可以從流動相中幾乎全部體積中排除。這就是說,1 L氦氣可以通過1 L流動相進行排氣。這樣的脫氣方法是好的,但是我國氦氣價格比較高,很少有實驗室采用這種方法。

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              2.加熱回流法。該方法的脫氣效果較好。運行時要注意冷凝塔的冷卻效率,否則溶劑流失,混流相比例將發生變化。3.抽真空除氣。這種方法可以用真空泵,將溶解氣體降到0.05~0.07 MPa。但真空脫氣將改變混合溶劑的組成,從而影響實驗的重復性,故多用于單溶劑體系的分析。4.超聲波除氣。超聲波清洗機內用超聲波對欲脫氣進行振蕩10~20分鐘。該方法的脫氣效果差。5.聯機通風。現商品 HPLC儀表,可與線式脫氣機配套。聯機除氣簡單,故障少,效果好。推薦購買儀器時一定要購買,有些公司為選購件,所以與儀器公司談配置時要和公司確認。




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              壓強和流量不穩定?其原因可能是需要排除的氣泡;或單向閥內有異物,可卸下單向閥,浸入內超聲清洗。有時候可以是砂濾棒內部出現氣泡,或者被細小鹽粒或滋生微生物部分堵塞,此時,可卸下砂濾棒浸入流動相超聲除氣泡,或將砂濾棒浸入稀酸(如4 mol/L)中迅速除去微生物,或將鹽溶解,再立即清洗。

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              為什么壓力太大還是太低?也許是管道堵塞了,需要清理清理。另一種可能是由于管道出現了泄漏。檢驗阻塞或泄漏時,應逐段進行。采用梯度洗脫時,由于多種溶劑混和成分發生變化,造成了一些特殊問題,必須引起注意:PS:(在液相色譜中對成分復雜的樣品,采用梯度洗脫法。在同一分析周期內,不停地改變流動相的濃度比例,稱為梯度洗脫。這樣,在一個復雜樣品中,性質差異較大的組分,就能達到各自合適的容量因子 k的分離效果。采用梯度洗脫法的優點:1.縮短分析周期2.提高分離能力3.改善峰型,很少拖尾;4.提高靈敏度。但是有時會導致基線偏移。)坡度洗脫的流動相選擇不當…要注意溶劑的溶解性,不相容性溶劑不能作為梯度洗脫的流動相。部分溶劑混溶于一定比例,超過一定范圍后就不能互溶,使用時更要注意。同時,在與緩沖溶液混合時,也會發生與緩沖劑混合,在使用過程中需要特別注意。



              色譜條件:通常的色譜條件包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速和進樣量。移動相是指在制備流動相所用水和試劑試液時,水的電阻率一般不超過18.2兆歐,而水的電阻率不超過18.2兆歐,其原因是為了防止水和試劑試液中雜質對色譜結果的干擾,測試液采用色譜級別。用不同的方法對色譜柱會有不同的要求,但是每一種色譜柱都有其清潔要求,這在色譜柱中可以找到,必須按照以上的要求來進行,否則會導致色譜柱效下降,色譜柱的使用壽命縮短,檢測波長會因品種的不同而有不同的要求,這里需要指出的是要注意觀察檢測器燈能量的變化,如基線波動大,活性成分的響應值突然變小等,對檢測器電鏡能量的變化有可能是突然變小等。流動速度也因品種而異,一般為1.0 ml/min,流速不能隨意改變,尤其作為 QC人員,但作為研發人員,有時為了摸索條件或進行方法耐用性驗證,會改變流速來評估該方法的適用性。對不同品種的進樣量也有不同的規定,進樣量這個現在都是自動進樣,所以進樣精密度都是很好的,不用特別強調。

              ,作為液相操作人員,必須認真學習夜想說明書,掌握液相硬件和軟件的操作,掌握日常維護,掌握基本故障的排除與維修。普通液相的操作規程也是由操作人員起草的,所以只要嚴格按照操作要求操作,一般都不會出現問題,當然要特別指出的是對液相的日常維護保養,如:液相的日常維護保養,泵密封墊的清洗,系統管路的清洗,溶劑過濾頭的清洗等。第二,操作者在配制液相分析樣品時,好由同一人單獨完成,以免不必要的意外誤差。


              泵使用要點把裝有溶劑瓶的溶劑箱放在泵上或更高的地方。對于四元泵,當使用鹽溶液或時,建議將鹽溶液與下方梯度閥口連接,使與上面梯度閥口連接,通道好在水或鹽溶液通道的正上方。推薦用水定期沖洗MCGV通道,去除可能在閥口析出的鹽結晶。開泵前,用至少兩個容積(標準脫氣機30 mL,微脫氣機10 mL)沖洗真空脫氣機,尤其是關閉一段時間后(如過夜),以及通道中使用揮發性混合溶劑,防止溶劑瓶內的玻璃濾頭(過濾器)堵塞和長菌,濾頭表面有黑色或黃色污染說明發生堵塞,應立即清洗或更換。

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              經常檢查排液閥的白頭過濾。檢驗方法:旋開排液閥,用水作流動相。對標準脫氣機(G1322A),流量5 ml/min的流量,如果壓力超過10 bar,建議更換。對微型脫氣機(G1379A),流量2 ml/min的流量,如果壓力超過5 bar,建議更換。使用低流速時,應檢查所有1/16英寸接頭是否有泄漏(用壓力試驗或液體泄漏試驗)。無論何時更換泵密封墊,排液閥的慮芯也應更換。對活塞密封墊進行更換時,應檢查活塞桿是否有劃痕。擦傷的活塞會造成輕微的泄漏,降低密封墊的使用壽命。擦傷的活塞應盡早更換。在使用緩沖溶液時,在關閉泵之前先用水沖洗系統。如果要長時間使用0.1摩爾或更高濃度的緩沖液,好選擇密封墊清洗附件,以減少密封墊和活塞桿的磨損。若使用高濃度緩沖鹽,可考慮采用熱水(50-60℃)沖洗鹽通道,以確保系統中不存在緩沖鹽殘留。



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