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發布時間:2020-12-20 07:40  
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低溫生物菌種的原理
菌種保藏有多種方法,其原理大多大同小異,主要是運用一些方式盡量降低生物體內的代謝,達到延長生命,減少變異的目的。通常采用的方法為低溫、缺氧、干燥。
低溫主要對菌種產生兩方面的影響,首先,較低的溫度可以減緩機體細胞的酶活,降低新陳代謝,達到保藏菌種的目的。其次,低溫同時會導致菌體誘發菌絲自溶機制,如果降溫過程失誤,同樣會造成機體的機械損傷和溶質損傷。
微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。
低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。
低溫生物菌種了解多少?
研究在低溫條件下生命活動的生物化學規律的新興學科,是低溫生物學的重要基礎。例如,在某些冬眠狀態的昆蟲體液中,甘油含量可高達25%,以致在-35℃的狀況下也不會冰凍。另一方面,利用低溫下變化減慢,來研究在常溫下變化較快的一些生物化學反應。如在酶的催化、蛋白質和核酸在溶液中的空間構象變化中。某些中間變化常溫下在千分之一秒的時間內即可完成,用一般方法難以探討,而在含有添加劑使溫度降至-40℃左右的溶液中,反應速度大為減慢就可用常規方法進行研究。
分離篩選低溫生物菌種的基本程序
流程
4.1 優良糖化酶菌株的分離與篩選
融化培養基→倒平板→打散孢子團粒→梯度稀釋→涂布平板→培養觀察→滴加碘液→挑菌落→接種→培養→糖化酶活力測定→菌種保存
4.2 酸乳制品中的乳酸菌的分離
制培養基→倒平板→梯度稀釋→涂布平板→培養觀察→挑菌落→接牛乳管→培養觀察→傳代培養→挑選凝乳管→乳酸測定→菌種保存
5 步驟
優良糖化酶菌株的分離與篩選
(1)融化淀粉察氏培養基,稍冷后倒平板與斜面數個。
(2)取種曲少許,加入10mL帶玻璃球的無菌生理鹽水的三角瓶中,用力振蕩打散孢子團粒,使之形成均勻的孢子懸浮粒。然后將其用無菌紗布過濾于無菌試管中。
(3)將上述濾液以10倍稀釋法知釋至10-7,取后3個稀釋度的稀釋液各0.2mL,于淀粉察氏培養基平板上用無菌涂布器分別依次涂布2至3個皿,30℃培養1~2d。
(5)性能測定:測定各菌落的糖化酶活力。
申請專利時,有新的低溫生物菌種的必須要辦理菌種保藏嗎?
如果專利得到了審批專利權人卻沒有構成專利的新菌種要件,顯而易見是需要保藏菌種的。發酵飼料原料與配方:配制好的發酵飼料1000公斤,水350-400公斤(夏天350,冬天400),菌種飼料發酵劑5公斤,100-200克納豆菌。 制作稀釋活化發酵液:將菌種5公斤飼料發酵劑和100-200克納豆菌倒入350-400公斤水中攪拌均勻制成活化發酵液。 將制成的活化發酵液與1000公斤發酵飼料混合均勻,濕度以手捏成團不滴水,一觸即散為宜。有攪拌機的大型養殖場將活化發酵液慢慢加入飼料中攪拌均勻即可;沒有攪拌機的養殖戶將活化發酵液慢慢少量噴到飼料上,用鐵鍬攪拌均勻,注意:不能有團塊、水結塊,用手將團塊、水結塊搓散攪拌均勻。 大型養殖場可以將配置好的飼料在地面壓實堆成垛或者裝入水泥池壓實,用塑料薄膜密封或者使用厚實的不透氣的塑料碎團塊、水結塊。