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坡度洗脫的流動相選擇不當要注意溶劑的溶解性，不相容性溶劑不能作為梯度洗脫的流動相。部分溶劑混溶于一定比例，超過一定范圍后就不能互溶，使用時更要注意。同時，在與緩沖溶液混合時，也會發生與緩沖劑混合，在使用過程中需要特別注意。不計空白梯度洗脫為保證良好的重復性，梯度洗脫的溶劑純度要求較高。由于弱溶劑中的雜質在色譜柱上被強溶劑洗脫，在分析樣品之前，必須對樣品進行空白梯度洗脫，識別溶劑雜質峰。分級洗脫溶劑需要完全脫氣，以防止在混合過程中產生氣泡。沒有考慮溶劑混合引起的粘度變化由于混合溶劑的粘度隨組分而變化，因此，在梯度洗脫過程中常常會發生壓力變化。比如，和水的粘度都比較小，當它們以相似比例混合時，粘度增加很大，這時的柱壓比或水為流動相時大一倍。所以在梯度洗脫時要注意防止壓力超過輸液泵或色譜柱可以承受的大壓力。

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六通閥的正確使用與維護①樣品進樣前，要用0.45μ的濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。②旋轉閥芯時不要太慢，不要停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內壓力急劇上升，甚至超過了泵的大壓力；再轉到進樣位置，過高的壓力會使柱頭損壞。③為了防止進樣閥內的緩沖鹽及樣品殘留，每次分析結束后應沖洗進樣閥。一般可采用清水沖洗，或先用溶樣溶劑沖洗，再用清水沖洗。

用不同的方法對色譜柱會有不同的要求，但是每一種色譜柱都有其清潔要求，這在色譜柱上可以找到，必須按照以上的要求來進行，否則會導致色譜柱效下降，色譜柱的使用壽命縮短，檢測波長會因品種的不同而有不同的要求，這里需要指出的是要注意觀察檢測器燈能量的變化，如基線波動大，活性成分的響應值突然變小等，對檢測器電鏡能量的變化，要注意觀察到檢測器中能量的變化，如基線波動大，活性成分的響應值突然變小等，有可能是由于燈的能量不足導致的，所以實際使用時要根據實際情況更換。流動速度也因品種而異，一般為1.0 ml/min，流速不能隨意改變，尤其作為 QC人員，但作為研發人員，有時為了摸索條件或進行方法耐用性驗證，會改變流速來評估該方法的適用性。對不同品種的進樣量也有不同的規定，進樣量這個現在都是自動進樣，所以進樣精密度都是很好的，不用特別強調。

操作員：，作為液相操作人員，必須認真學習夜想說明書，掌握液相硬件和軟件的操作，掌握日常維護，掌握基本故障的排除與維修。普通液相的操作規程也是由操作人員起草的，因此只要嚴格按照操作要求操作，一般都不會出現問題，當然對液相的日常維護維護來說，特別是對液相的日常維護保養來說，要注意的是液相的日常維護保養，泵密封墊的清洗、系統的清洗、溶劑過濾頭的清洗等方面都不會出現問題，尤其是對液相的日常維護，不會造成不必要的麻煩。第二，操作者在配制液相分析樣品時，好由同一人單獨完成，以免不必要的意外誤差。4、液體安裝環境：儀表應盡量安裝在水平位置，遠離振動、電磁干擾的屋內，有條件時盡量把液相數據處理系統分開，一方面是防止色譜基線噪聲太大、基線不穩等，一方面是為了減少對人體的危害。

先要認識到，一般國產其實不需要額外的過濾處理，直接使用是沒有問題的。甚至某些固體顆粒雜質，都可以從液相流路系統前端的過濾頭中排除。真正容易出現問題的是水中的細菌。新制純水在室內放置數天后會產生細菌，而這些細菌雖然肉眼看不到，卻足以堵塞柱狀填料顆粒的空隙，導致柱子迅速報廢。

色譜儀是一種易學難用的儀器，尤其注重儀器的正確使用。流體工作者接觸到流動相，流動相是引起液相色譜各種問題的主要來源。液相色譜儀常見的故障有堵塞和漏漏。以下對這兩點分別展開討論。(注：流動相以為例，色譜柱以C18為例)“堵”的現象是柱壓異常升高，直接原因是流路不暢。造成“堵塞”的原因：流動相中的細菌污染。阻塞主要發生在色譜柱前端，流動相中存在雜質，細菌是雜質的主要來源。長時間，濾頭粘附細菌，造成泵液不能正常工作這一問題的解決辦法就是保證水的可靠性。以下是兩種建議方法：(1)好購買實驗室純水機，既方便又可靠，質量也放心。的缺點是價格昂貴。(2)成箱購買市售品牌純凈水，如怡寶或娃哈哈500 ml，這些水的質量足以滿足液相色譜的要求。有一個細節值得注意：在絕大多數書籍中，凡談到配制流動相到都要進行過濾的步驟。