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發(fā)布時(shí)間:2021-10-19 05:09  
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操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

洗板方法手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),并得到直線(xiàn)回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。
主要有:(1)自身檢測(cè)試劑盒,包括ELISA和IFA類(lèi);(2)ELISA試劑盒,包括人、大鼠、小鼠、兔、狗、羊、猴子、豬、豚鼠、馬類(lèi)、尿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液檢測(cè)試劑盒;(3)流式細(xì)胞儀用試劑類(lèi),包括CD系列、系列等;(4)乳膠手工及上機(jī)試劑,包括透光比濁檢測(cè)試劑;(5)檢測(cè)試劑盒,包括微色譜柱類(lèi)檢測(cè)試劑;