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發(fā)布時間：2021-07-28 19:29
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ELISA試劑盒的安全性
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4． 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
5． 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
6． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
ELISA試劑盒——會出現(xiàn)的問題及解決辦法
標準曲線線性不佳，或是平行性不好。
a.原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
解決辦法： 請確認溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。
b.原因：操作時間拖太久。
解決辦法：請在方法熟練后再進行操作。
c.原因：微孔間相互污染。
解決辦法： 加樣品時，請小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。
d.原因：標準品或酶標記物所加入的量不一致。
解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。
e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。
解決辦法：加樣品或試劑時，吸頭請勿接觸微孔。
f.原因：洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進行下一步驟)。
解決辦法：請隨時監(jiān)控洗板過程，洗完后立即進行下一步驟。
Elisa試劑盒注意事項
Elisa試劑盒解凍與存放：-20℃取出后建議放入2～8℃冰箱中解凍約，每隔一段時間輕輕搖晃均勻，不可直接放入溫度較高處解凍，避免因溫度改變太大，造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀，其質(zhì)量下降。若短期無法用完一瓶，建議無菌分裝,再放回冷凍，避免反復(fù)凍融。4℃長時間保存后的變性脂蛋白及纖維蛋白，形成絮狀物質(zhì)變差。
Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案
不正常的標準曲線
1 錯誤的方法重懸標準品 加入正確量的溶液重懸標準品，重懸充分
2 標準品稀釋錯誤 按照說明書要求稀釋標準品
3 標準品污染 使用一次性的滅菌吸頭， 標準品貯存于2-8 ℃
4 錯誤的倍比稀釋步驟 按照說明書倍比稀釋標準品
5 波長選擇錯誤 TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，而 前者比色波長為450nm，后者為492nm。雙波長比色分析優(yōu)于單波長。
6 標準品混用 不同批號試劑勿混用
7 試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高，標準品失活 盡量縮短運輸時間，夏季應(yīng)放冰塊降溫
8 ELISA未終止而直接檢測450nm和620nm TMB顯色需終止后檢測，否則會出現(xiàn)620nm比450nm讀數(shù)高的現(xiàn)象。（數(shù)值仍有梯度規(guī)律）
