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              發布時間:2020-12-31 07:24  

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              PCR實驗室條件:

              1、必須擁有標準的的PCR熒光實驗室;實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到廣泛應用。本文試就其定量原理、方法及參照問題作一介紹

              2、檢測設備必須符合標準PCR熒光實驗室設置要求;熒光定量PCR儀 實時熒光定量試劑 通用電腦 自動分析軟件,構成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統。








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              PCR實驗室完備的實驗室配套設施

              完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件,應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器,如超凈工作臺、離心機、加樣器等。

              PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域:試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。為避免交叉污染,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。






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              污染的預防與控制

              PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染。常見的有以下幾種污染類型:擴增產物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標本間的污染。要避免污染,首先應是預防,而不是排除。

              標準的PCR實驗區

              試劑準備區、標本制備區、擴增區、產物分析區、各區配套的緩沖區及公共走廊。臨床基因擴增檢驗實驗室設計的核心問題是如何避免污染。









              PCR實驗室應相對獨立,盡量避免與其他普通實驗套疊或者有通道上的交叉。之前看過一個圖,他們的PCR實驗室設置在檢驗科的里面,醫廢和標本的運送要穿過檢驗科的整個走廊,這種情況人、物流、污物均在同一個通道,感ran風險較高,應盡量避免。

              PCR實驗室應設置以下區域:試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增區、擴增產物分析區。這個4個區域在物理空間上必須完全獨立,各區域無論是空間上還是在使用中,應當始終處于完全的分割狀態,不能有空氣的直接相通。根據使用儀器的功能,區域可以適當合并。每個區域間設置傳遞窗,要求一側打開時另一側無法打開。

              4個區域應設置獨立的緩沖間,應設置可以通到四個操作區域的PCR走廊,在進入各區域前,應設置更衣間,每個區域的衣服可用不同顏色進行區分,在清潔區應設置洗澡間、衛生間、值班室。還應考慮到醫廢和標本的運送通道。





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