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發布時間:2020-10-04 18:14  
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PCR實驗室的設計原則
使用實時熒光PCR儀,擴增區、擴增產物分析區可合并;
采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀,則標本制備區、擴增區、擴增產物分析區可合并。
PCR實驗室工作基本原則
1.進入各工作區域應當嚴格按照單一方向進行
試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→ 擴增產物分析區。
2.各工作區域必須有明確的標記,不同工作區域內的設備、物品不得混用。
PCR實驗室注意事項——擴增產物分析區
核酸擴增后產物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法、直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法、質譜分析等。
由于紫外照射的距離和能量對去污染的效果非常關鍵,因此可使用可移動紫外燈(254nm波長),在工作完成后調至實驗臺上60~90cm內照射。
PCR實驗室注意事項——標本制備區
為避免樣本間的交叉污染,加入待測核酸后,必須蓋好含反應混合液的反應管。對具有潛在危險性的材料,必須在生物安全柜內開蓋,并有明確的樣本處理和滅活程序。
PCR實驗室注意事項——擴增區
為避免氣溶膠所致的污染,應當盡量減少在本區內的走動。必須注意的是,所有經過檢測的反應管不得在此區域打開。
由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發生氣溶膠所致的污染,可通過在本區內設立正壓條件,避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。
PCR實驗室布局
PCR實驗室原則上為試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產物分析區四個單獨的工作區域并設有專用走廊,各工作區域應設緩沖間,工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。