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反相色譜分離純化后，怎樣除去流動相產品中的TFA和乙腈或其他雜質？

TFA是反相色譜分離中常用的添加劑。可以用凍干的辦法去除，國外許多文獻是這樣報道的。還可以試試離子交換、凝膠層析、甚至透析和超濾，其中，離子交換層析效果比較好，還可以起到濃縮樣品的作用。

首先，凍干的辦法應該可以幾乎完全地除去TFA和乙腈，藥品實驗前盡量先檢測一下凍干品中的殘留量，只要不超過允許范圍，這種辦法是很簡單、有效的。

其次，如果你的藥品的分裝量不大的話(<100ug)，建議你用離子交換層析，盡量裝一個小一點兒的柱子，讓含鹽洗脫峰的蛋白濃度達10mg/mL以上，稀釋后完全符合試驗要求。如果用分子篩，考慮稀釋，盡量也先過一個離子交換。此外可以試試疏水層析。如果產品是堿的話，可能會形成TFA鹽，這樣通過上述方法就無法除去。一般可以用堿水洗，然后將產品萃取出來。或者在里面加入一定量的鹽酸，再干燥后形成鹽酸鹽。

制備色譜之DAC如何次次裝出高柱效

動態軸向壓縮柱（Dynamic Axial Compression Column，DAC）是工業化制備液相色譜分離的重要組成部分。當用戶填裝直徑50mm以上制備柱時，傳統預裝柱很難裝出高柱效和對稱性，另外預裝柱使用過程柱頭容易塌陷，導致柱效變差，無法滿足長期持續純化生產。DAC在運行過程中，活塞可以提供持續壓力，保證很優的填裝柱床密度和穩定性，從而長時間保持很佳分離效果。相比于預裝柱或彈簧柱，DAC可以輕松填裝和拆卸，實現不同填料反復填裝和輕松切換。有人說大柱子不用考慮柱效和對稱性，只要能分出樣品就行。現實是色譜就是靠柱效來分離的，柱效越高，分離越好，載量越大，收率和得率越高。

通常制備色譜方法開發在4.6mm，10mm或20mm的半制備柱，然后放大到DAC50或DAC100, DAC200，DAC300, DAC450, DAC600或DAC800。理論上多大規模的色譜柱都可以實現與分析柱或半制備柱同樣的效率，在現實中，設計優良的DAC柱效甚至高于預裝柱。只有柱效和對稱性類似才能保證了分離方法的線性放大。

制備色譜

制備色譜是以分離出純物質為目的的色譜系統，分析色譜是以分析出樣品組分信息為目的的色譜系統，基于他們目的的不同，制備色譜相對于分析色譜有很多不同特征，不能簡單等同。

當我們在實驗室中想得到納克乃至毫克級的純物質時，稍微改裝下分析型色譜系統就能簡單輕松的完成，不過，若所需制備的純品量很大，此時，再用分析型色譜系統分離純化，可以預見這將是一場“災難”。

制備色譜常用的色譜模式有低壓，中壓，高壓三種，以應對不同類型和不同純度要求的樣品的分離，同時盡可能減少成本。

工業制備色譜

工業制備色譜系統.電氣柜設置在機架內部左上端,過墻兩通連接二號兩通球閥,二號兩通球閥通過單向閥連連接流量調節閥,一號質量流量計一端連接流量調節閥,質量流量計另一端通過混合器連接至三號三通球閥與數個進樣泵,進樣泵通過二號三通球閥連接壓力變送器,一號三通球閥通過管道分別連接至在線過濾器與二號質量流量計,二號質量流量計則通過壓力變送器與一號兩通球閥連接至流量計顯示器,電機連接進樣泵;采用上述技術方案后,本實用新型有益效果為:其分離效率和生產能力大大高于傳統的柱層析設備,并可實現在線監測,保證產品的質量.