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液相色譜儀色譜柱失效的原因

裝填不良的色譜柱，在短時間應用后，填充床的壓縮通常使柱頭處產生塌陷，導致柱效突然降低。液相色譜儀色譜柱的初始評價指標，如塔板數、不對稱因子等往往不能很好地表征色譜柱床層的穩定性，這種情緒只能在實際應用中發現。

液相色譜儀色譜柱使用過程中的驟然壓力波動、機械撞擊或溫度驟然變化都會對色譜柱床層產生影響，導致峰形變差和柱效降低。進樣過程中，進樣閥轉動太慢可引起壓力波動，使色譜柱床產生裂隙，在柱切換時也存在同樣的問題。使用填充良好的色譜柱，在較低柱壓下操作，可大大減少由壓力波動造成的色譜柱損壞。

固相萃取柱和液相色譜柱的比較

兩者本質上是不同的東西，固相萃取柱是用來做固相萃取用的，主要作用是過濾和富集樣品，而液相色譜柱是液相色譜上使用的，用來分析樣品的。

固相萃取柱是樣品處理的時候用的，液相色譜柱是儀器上的一個配件相當于，機子不可或缺的一部分，使組分分開才進檢測器檢測的。

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液相色譜柱外界因素影響

色譜是一種分離分析手段，分離是，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球（包括離子交換樹脂）、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數的柱效；對于同系物分析，只要500即可；對于較難分離物質對則可采用高達2萬的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復雜混合物分析的需要。

柱效受柱內外因素影響，為使色譜柱達到佳效率，除柱外死體積要小外，還要有合理的柱結構（盡可能減少填充床以外的死體積）及裝填技術。即使好的裝填技術，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的，靠近管壁的部位比較疏松，易產生溝流，流速較快，影響沖洗劑的流形，使譜帶加寬，這就是管壁效應。這種管壁區大約是從管壁向內算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統中，柱外效應對柱效的影響遠遠大于管壁效應。

液相色譜柱操作

1、如果流動相含有酸或無機鹽，應當先用去離子水（20倍柱體積）沖洗干凈。然后用用100%或保存色譜柱。用柱子的接頭密封，并放在穩定的環境中存放。

2、應避免色譜柱受到直接的機械沖擊或摔落，避免造成色譜柱性能的降低。

色譜柱的再生用相當于20倍柱體積的溶劑按下列順序沖洗柱子，建議按柱子的箭頭方向沖洗，盡可能不反沖。沖洗時使用的的參考溶劑順序是水、、、異。