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重組EGFR（N826S）和野l(fā)生型蛋白的蛋白質(zhì)印跡分析。 用抗EGFR（N826S）小鼠抗l體將純化的帶His標(biāo)簽的EGFR（N826S）蛋白（702-987）（Cat。＃10221）和相應(yīng)的野l(fā)生型蛋白（702-987）（Cat。＃10210）進(jìn)行印跡。

用抗EGFR（N826S）抗l體表達(dá)EGFR蛋白的細(xì)胞的免l疫熒光。 將HEK293T細(xì)胞用pCDNA3-GFP EGFR（WT）質(zhì)粒（左列）或pCDNA3-GFP-EGFR（N826S）質(zhì)粒（右列）轉(zhuǎn)染，然后固定并用抗EGFR（N826S）單克l隆抗l體染色。

缺失:從DNA中去除一個(gè)或多個(gè)核苷酸。像插入一樣，這些突變可以改變基因的閱讀框架。一般來說，它們是不可逆轉(zhuǎn)的。

替換:通常由化學(xué)物質(zhì)或DNA復(fù)l制失常引起的替換突變將基因中的單個(gè)核苷酸替換為另一個(gè)核苷酸。較常見的是piao呤和piao呤或嘧l啶與嘧l啶間的替換，也稱轉(zhuǎn)換。不常見的是易位，也稱顛換，它將piao呤替換為嘧l啶或?qū)⑧譴啶替換為piao呤。

重組Erb-B2的免l疫印跡分析

蛋白質(zhì)。純化了His標(biāo)記的Erb-B2蛋白（Cat。

#10208）用抗Erb-B2印跡

單克l隆抗l體（Cat。#26127頁）。

免l疫組織化學(xué)分析

石蠟包埋人乳l腺癌

抗Erb-B2單克l隆抗l體組織

（貓。#26127頁）。組織樣本用

甲醛和1%血l清封閉15次

37°C時(shí)zui小值。抗原回收是通過加熱進(jìn)行的

在檸檬酸鹽緩沖液（pH6）中進(jìn)行調(diào)解。樣本是

然后用一級抗l體（1:50）孵育

稀釋）在4°C下過夜。HRP共軛

以山羊抗鼠IgG（1:50稀釋液）作為對照

次級抗l體。

表達(dá)細(xì)胞的免l疫熒光

抗ERBB2蛋白（D769Y）

抗l體。轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞

pCDNA3-GFP-ERBB2（D769Y）質(zhì)粒，pCDNA3-GFP-ERBB2（WT）質(zhì)粒或

pCDNA3-GFP-ERBB2（D769H）質(zhì)粒，固定后用抗ERBB2（D769Y）染色

單克l隆抗l體（Cat。#26382頁）。