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發布時間:2020-12-08 09:33  
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廣州碩譜生物科技有限公司聚合物SPE類型
SPE小柱的填料裝實后,當通過小柱的流速較低時,液體是以層流的方式通過填料層,將填料層浸潤充分,濕潤的液面截層逐級向前推進,見附圖;當流速過大的時候,而柱床厚度較高時,可能會在填料內部形成溝渠通道,液流將通過溝渠,快速通過小柱,而使得填料的浸潤變得不充分,這樣將使得體與填料的接觸面積大大降低,嚴重影響填料對目標物質的保留效果。
鑒于大部分化合物都具有多種功能基團,在實際操作中,主要根據目標物和干擾物的性質考慮采用何種萃取機理。例如:2-萘胺為弱堿性化合物(pKa=4.16),在一定 pH條件下可呈陽離子化狀態,同時又具有疏水和親水基。此時可根據樣品基質選擇有利于目標物與干擾物分離的萃取機理。在目標物處于極性較弱的樣品基質中時,可利用極性相互作用,選擇正相萃取方式;而在極性樣品環境下,則可采用反相萃取方式。采用陽離子交換機制,可將萃取過程中 pH調至低于目標物 pKa的兩個 pH單位,即 pH=2.16。
離子交換固相萃取小柱方法開發中需要注意的問題。
離子交換固相萃取適用于可解離成帶電離子的化合物,其機理是利用帶電荷的目標化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。樣品基質可以是極性的,如水溶液,也可以是非極性的有機溶液,但在實際應用中以水溶液較多,包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。
常見反相鍵合硅膠吸附劑的類型
C18柱
C18是目前使用zui多的一種SPE柱,根據2003年的一項統計,在所有使用
的SPE柱中,C18柱占了56%左右。C18柱的主要官能團是十八烷基( octade-cyl),其主要作用力是非極性,第二作用力是極性、陽離子交換。在所有鍵合硅
膠SPE吸附劑中,C18柱的非極性吸附能力zui強。因此,強非極性化合物被C18
吸附后可能較難洗脫。C18難吸附極性非常強的分子,如碳水化合物( carbohy
-drates).C18一般被當作zui沒有選擇性或通用型的吸附劑,因為絕大多數有機分子或多或少含有非極性基團,C18可以從水溶液中吸附這些有機化合物。因此C18對于同時分離不同結構的化合物時較為適用。由于C18的選擇性較低,其zui終萃取物往往沒有其他選擇性高的填料那么干凈。在蛋白質純化中,C18柱是優1秀的除鹽工具,因為樣品中的鹽在C18柱上沒有保留。C18的極性副作用力比其他鍵合硅膠SPE吸附劑低許多,主要是碳鏈較長的原因。